Recherche Avancée

Thèse soutenue

Le transporteur mitochondrial d'ADP/ATP : aspects fondamentaux et implications dans des pathologies

FR  |  
EN
Auteur / Autrice : Christelle Fiore
Direction : Gérard Brandolin
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie
Date : Soutenance en 1998
Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Résumé

FR

Le transporteur mitochondrial d'adp/atp est une proteine de la membrane interne mitochondriale qui assure l'export, vers le cytoplasme, de l'atp neo-synthetise dans la matrice, en echange d'adp. Ce systeme de transport peut etre inhibe de maniere specifique par l'atractyloside (atr) et le carboxyatractyloside (catr) d'une part, et l'acide bongkrekique (ba) d'autre part, molecules qui se fixent avec une forte affinite sur le transporteur. Le premier volet du travail presente dans ce memoire traite de la purification du transporteur d'adp/atp de la levure saccharomyces cerevisiae par chromatographie d'affinite sur un support portant des ions metalliques immobilises. Pour cela, l'isoforme anc2 du transporteur a ete genetiquement modifiee de maniere a porter un enchainement polyhistidine, sans que le niveau d'expression et les proprietes fonctionnelles du transporteur soient modifies. Nous avons purifie le transporteur anc2-phis jusqu'a homogeneite, a la fois sous forme libre et sous la forme de complexes avec les inhibiteurs catr et ba. Nous avons montre, dans des essais preliminaires de cristallogenese 2d, que le complexe anc2-phis-catr s'organisait en plaques pseudo-cristallines. Le seconde partie du travail se rapporte au contexte de la pathologie moleculaire des transports mitochondriaux. Nous avons developpe des outils biochimiques, derives fluorescents de l'atractyloside, et immunologiques, pour rechercher l'implication du transporteur d'adp/atp dans certaines formes de myopathies humaines non caracterisees. Les methodes presentees ont ete validees par l'analyse d'echantillons de muscle sain avant d'etre appliquees a l'exploration du muscle malade.