Etude de l'organisation supramoleculaire de la peau par diffusion des rayons x et microscopie electronique. Application a la peau reconstruite et au derme cryopreserve

Study of supramolecular organization of skin by x-rays scattering and electron microscopy. Application to reconstructed skin and cryopreserved dermis

• Auteur / Autrice : Cécile Mérigoux
• Direction : Dominique Durand
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le but de cette these a ete de determiner l'organisation moleculaire et supramoleculaire des constituants majeurs de la peau -collagene dans le derme et lipides dans l'epiderme-, afin de pouvoir etablir une comparaison, sur le plan structural, entre la peau et ses substituts. Nous avons eu recours a la diffusion des rayons x et a la microscopie electronique, dont la complementarite s'est revelee indispensable. En ce qui concerne le derme, nous avons elabore un modele de l'organisation des fibrilles de collagene, a partir des observations faites en microscopie electronique, puis calcule pour ce modele, l'intensite diffusee par les rayons x, donnant une image assez complete de l'organisation du collagene. Le derme normal est constitue de faisceaux, chacun etant compose de fibrilles de collagene paralleles, arrangees majoritairement suivant un ordre hexagonal a courte distance. Les fibrilles sont constituees d'un cur de collagene entourees d'une gaine de proteoglycanes. A l'interieur de la fibrille, l'ordre entre les molecules peut etre decrit par un reseau hexagonal, siege d'un desordre de deuxieme espece. Ensuite, nous avons determine l'organisation des lipides de la couche superieure de l'epiderme (stratum corneum), cet agencement est crucial dans la propriete barriere de l'epiderme. Les profils experimentaux de diffusion des rayons x sont simules a partir d'un modele prenant en compte le ciment lipidique intercorneocytaire represente par un seul systeme de couches lipidiques et le cytosquelette des corneocytes. Cette simulation rend tres bien compte des profils experimentaux. Ces arrangements macromoleculaires ont finalement ete etudies dans trois subsituts cutanes. Nous avons montre, d'une part, que l'organisation supramoleculaire dans une peau reconstruite vivante et une matrice ordonnee de collagene etait loin de mimer celle du derme normal, et d'autre part que l'organisation suprafibrillaire etait modifiee irreversiblement dans les dermes cryopreserves.