Thèse soutenue

La substitution des glucanes periplasmiques osmoregules d'escherichia coli
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Auteur / Autrice : ERIC LANFROY
Direction : Jean-Pierre Bohin
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

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Les glucanes periplasmiques osmoregules sont des composes synthetises par les bacteries a gram negatif qui jouent un role important dans les relations qu'entretiennent ces bacteries avec leur environnement. Chez escherichia coli, ces glucanes sont appeles mdo pour membrane-derived oligosaccharide. Ils sont formes d'un squelette de 6 a 12 residus de glucose lies par des liaisons beta-1,2 et beta-1,6. La substitution du mdo par du phosphoglycerol provenant des tetes polaires du phosphatidylglycerol induit un important renouvellement des phospholipides. Cette reaction est catalysee par la phosphoglycerol-transferase i codee par le locus mdob. Dans ce travail, le clonage moleculaire et le sequencage nucleotidique du locus mdob ont montre que la proteine mdob est constituee de 763 acides amines avec une masse moleculaire estimee de 85 kda. Des fusions de proteines entre mdob et la beta-lactamase ont montre la presence dans la bacterie de deux formes differentes de mdob. La premiere est la proteine complete de 85 kda, liee a la membrane interne par quatre segments transmembranaires. La seconde est une forme plus courte, libre dans le periplasme, inactive dans la substitution du mdo par le phosphoglycerol. Le mdo est aussi substitue par de la phosphoethanolamine et du succinate. Il n'existe pas de phenotype associe a l'absence de mdo. Par une analyse systematique par chromatographie sur couche mince de chacun des clones d'une mutagenese par transposon nous avons obtenu un mutant incapable de substituer le mdo par le succinate. Le clonage de la mutation et des etudes genetiques nous ont permis de localiser mdoc, le locus correspondant, juste en amont du locus mdogh codant les proteines impliquees dans la biosynthese du squelette glucosidique.