Etablissement et caracterisation d'une lignee de cellules de sertoli pour l'etude des communications intercellulaires dans le testicule

par VERONIQUE BOURDON

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de Georges Pointis.

Soutenue en 1997

à Nice .

mots clés

• Activateurs du plasminogène
• Lignées cellulaires

Résumé

L'analyse de la fonction sertolienne se heurte a la complexite des interactions existantes dans le testicule et aux problemes lies aux cultures primaires. Pour la plupart d'entre elles, les lignees de cellules de sertoli sont issues d'animaux immatures et/ou ont un phenotype proche de cellules transformees. Nous avons utilise des familles de souris transgeniques exprimant l'antigene grand t du virus polyome (pylt). L'oncogene plt qui code pour pylt induit l'immortalisation cellulaire, les cellules se multiplient en culture et ont des caracteristiques de cellules normales et n'evoluent pas vers un phenotype de cellules transformees. Une lignee, 42gpa9, a ete etablie a partir de cellules de sertoli issues de testicules histologiquement et fonctionnellement normaux de males pylt adultes. Elle est maintenue en culture depuis trois ans. Les cellules possedent des caracteristiques de cellules normales : inhibition de contact, croissance sur support solide, cytosquelette d'actine organise en fibres de tension. Elles sont morphologiquement semblables aux cellules de sertoli et expriment de nombreux caracteres sertoliens (transferrine, sgp-2, scf, tpa) sans exprimer de marqueurs leydigiens ou germinaux (3-hsd, ldh-x). Les cellules de la lignee 42gpa9 ont conserve une intense activite phagocytosique et repondent a la fsh. Elles forment a confluence des complexes jonctionnels, comparables a ceux observes in vivo, composes de jonctions serrees et communicantes. In situ, les cellules de sertoli sont soumises a divers types de regulation (endocrine, et locales). La lignee 42gpa9 nous a servi de modele pour etudier deux formes de regulations locales, d'une part, l'influence de la phagocytose sur le systeme activateur du plasminogene sertolien et d'autre part d'apprehender le role des jonctions communicantes et de leurs proteines contitutives, les connexines, dans la communication cellule a cellule au sein de l'epithelium seminifere.

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