Préparation et activité nucléase d'une molécule conjuguée "métalloporphyrine-Hoechst 33258" comme agent de reconnaissance du petit sillon de l'ADN

Synthesis and nuclease activity of a conjugate metalloporphyrin-hoechst 33258 as a dna minor groove binding agent

• Auteur / Autrice : Silvana Frau
• Direction : J. BERNADOU
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie bioinorganique. Chimie des acides nucléiques
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Bléomycine

Interactions ADN-ligand

ADN -- Altération

Porphyrines

Résumé

Ce memoire presente des travaux visant a modeliser la bleomycine, un antibiotique d'origine naturelle, capable de degrader l'adn par un mecanisme d'oxydation de type cytochrome p450. Nous avons prepare une molecule hybride metalloporphyrine-hoechst 33258 associant un agent de reconnaissance du petit sillon de l'adn (h33258) a une porphyrine cationique de manganese, catalyseur biomimetique d'oxydation connue pour son activite nuclease. Le premier chapitre est consacre a des rappels bibliographiques sur la nature des interactions de h33258 avec l'adn, generalement etudiee grace aux methodes physico-chimiques et biologiques courantes (gels d'empreintes, modelisation moleculaire, spectroscopies d'absorption et d'emission, spectroscopie de resonance, cristallographie). Dans un deuxieme chapitre, nous decrivons la synthese du compose metalloporphyrine-hoechst 33258 en plusieurs etapes: fonctionnalisation des deux synthons de depart, couplage pour former la molecule hybride, quaternarisation qui conduit a une structure polycationique a haute affinite pour l'adn, puis metallation de l'hybride. Plusieurs metaux ont ete inseres dans le cycle porphyrinique: le manganese pour ses proprietes redox, le nickel comme controle et le zinc pour d'eventuelles etudes de chimie luminescence. Enfin, dans un troisieme chapitre nous mettons en evidence les proprietes nucleases de la molecule metallee par le manganese, et, a partir des sites de coupures identifies, nous apprehendons et discutons ses differents modes d'interactions avec les acides nucleiques etudies. L'equilibre en solution du complexe ligand-adn est etudie par spectroscopie d'absorption afin d'estimer la constante d'affinite de cette molecule hybride pour des polymeres poly(da. Dt)