Étude du métabolisme azote des champignons ectomycorhiziens (Cenococcum geophilum, Scleroderma verrucosum) et des mycorhizes d'eucalyptus : optimisation et application des techniques de dosage des molécules anioniques et cationiques par électrophorèse capillaire

par Deddi Prima Putra

Thèse de doctorat en Biologie forestière

Sous la direction de Bernard Botton.

Soutenue en 1996

à Nancy 1 , en partenariat avec Université Henri Poincaré Nancy 1. Faculté des sciences et techniques (autre partenaire) .

mots clés

• Ectomycorhize
• Cenococcum geophilum
• Métabolisme
• Azote composé
• Électrophorèse
• Capillarité
• Activité enzymatique
• Glutamate déshydrogénase (NADP+)
• Glutamate-ammonia ligase
• Glutamate synthase (NADPH)
• Assimilation
• Aminoacide
• Anion minéral
• Cation minéral
• Eucalyptus diversicolor
• Scleroderma verrucosum
• Métabolisme de l'azote
• Cenococcum geophilum
• Scleroderma (champignons)
• Ectomycorhizes

Résumé

Le métabolisme azoté a été étudié chez deux champignons ectomycorhiziens : l'ascomycète Cenococcum geophilum et le basidiomycète Scleroderma verrucosum ainsi que chez les ectomycorhizes constituées par S. Verrucosum et Eucalyptus diversicolor. Chez C. Geophilum, la méthionine sulfoximine (MSX) inhibe fortement l'activité de la glutamine synthétase (GS) et de la glutamate déshydrogénase à NADP (GDH à NADP). L'albizzine inhibe l'accumulation du glutamate ce qui indique une implication de la glutamate synthase (GOGAT). C. Geophilum assimile donc l'azote par la voie GDH à NADP et le cycle GS/GOGAT. S. Verrucosum utilise bien l'azote nitrique et la nitrate réductase est réprimé par l'ammonium. Les dosages enzymatiques montrent que le champignon assimile l'azote via le cycle GS/GOGAT et l'activité de la GDH à NADP est faible. Chez S. Verrucosum associé à E. Diversicolor, le 14C-glutamate est rapidement métabolisé en glutamine par la GS. Cependant, l'accumulation de l'aspartate et de l'alanine marque au 14C est importante, même en présence de MSX, indiquant la grande efficacité des aminotransférases de la plante-hôte pour fournir des acides aminés. Les champignons étudiés appartiennent par conséquent à deux groupes: l'un représenté par C. Geophilum qui possède la GDH à NADP et le cycle GS/GOGAT et l'autre représenté par S. Verrucosum qui ne possède que le cycle GS/GOGAT. L’utilisation de l'électrophorèse capillaire a permis la séparation des acides organiques, en particulier ceux du cycle de Krebs et la détermination de l'ammonium, du nitrate, d'acides aminés particuliers (desmosine, isodesmosine), ainsi que de nombreux autres anions et cations inorganiques

Titre traduit

Nitrogen metabolism in the ectomycorrhizal fungi (Cenococcum geophilum. Scleroderma verrucosum) and Eucalypt ectomycorrhizal : optimisation and application of measurement of anionic and cationic compounds by capillary electrophoresis

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