Caractérisation du facteur de transcription E2F de poulet : étude de son pouvoir oncogène et de son rôle dans l'induction, par l'oncogène v-src, de la prolifération de cellules de neurorétines de poulet in vitro

Characterization of the chicken E2F transcription factor : study of its oncogenic potential and its role in the proliferation, induced by v-src, of chicken neuroretina cells in vitro

• Auteur / Autrice : Stéphane Pasteau
• Direction : Georges Brun
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Lyon, École normale supérieure (sciences)

Mots clés

Mots clés libres

Sciences biologiques fondamentales et appliquees, psychologie

Résumé

Le contrôle transcriptionnel de nombreux gènes exprimes lors de la transition G1/S du cycle cellulaire est sous la dépendance du facteur de transcription E2F/DP. Une partie de la régulation fonctionnelle de E2F repose sur sa capacité à former un complexe avec la protéine du rétinoblastome (PRB) pendant la phase G1, ce qui inhibe alors son rôle de transactivateur. Les effets de la perte de fonction de PRB suggèrent que l'activité E2F pourrait être un élément important du contrôle du développement du tissu nerveux et de l'arrêt prolifératif précoce de ces cellules. Nous avons entrepris de tester cette hypothèse en exploitant le modelé de la neurocrine aviaire (CNR) qui permet d'étudier les capacités prolifératives de cellules nerveuses in vivo, au cours du développement embryonnaire, et in vitro en réponse a l'induction de la division de ces cellules par le virus du sarcome de Rous. Nous avons isolé l’ADNc des gènes E2F-1, dp-1 et dp-2 aviaire. Seule l'expression de E2F varie au cours du cycle cellulaire, sa transcription étant activée en fin de phase G1. Par hybridation in situ, nous observons une expression de E2F-1 plus forte dans la rétine que dans les tissus environnants et qui est maximale dans les étapes précoces d'accumulation des neuroblastes, pour disparaitre en phase de différenciation. Le développement de protéines mutantes de E2F-1 a permis l'isolement de mutants dominants négatifs de la fonction E2F. L'étude des CNR, infectées par le RSV, semble indiquer que E2F est nécessaire mais insuffisant pour médier les effets mitogènes de v-src. En parallèle, nous avons teste le potentiel oncogène du facteur E2F-1 aviaire. La protéine E2F-1 ne permet que la prolifération en milieu pauvre en sérum, mais la délétion de son domaine de liaison a PRB permet l'apparition d'un potentiel oncogène.