Le Salmonella sulA-test : un nouveau test in vitro pour la détection de produits génotoxiques

par Mohammed El Mzibri

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et microbiologie

Sous la direction de Michel de Méo.

Soutenue en 1996

à Aix-Marseille 2 , en partenariat avec Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (autre partenaire) .

mots clés

Résumé

L'induction des fonctions sos chez les bacteries est un bon outil pour la detection de produits genotoxiques. Dans le but de creer un nouveau test impliquant les fonctions sos, nous avons essaye de placer le gene lacz sous controle d'un gene inductible du prophage fels2 dans la souche salmonella typhimurium ta1538 en utilisant le phage hybride lambda-placmu. Nos resultats montrent que la transposition dans la souche ta1538lamb#+ est impossible. En effet, la presence de la mutation rfae confere a la souche une resistance a l'infection par le phage lambda ou ses derives en empechant la fixation du recepteur lamb sur le lipopolysaccharide. Nos travaux se sont donc orientes vers la mise au point du salmonella sula-test, base sur l'induction du gene sula. Pour cela nous avons construit le plasmide pem1968 (sula::lacz). Ainsi, l'expression du gene sula, dans la souche ta1538 est suivie par simple dosage colorimetrique de la beta-galactosidase. Apres optimisation des conditions operatoires et de la fraction metabolique, nous avons teste 60 molecules chimiques ayant des modes d'action differents. Base sur les valeurs du pouvoir inducteur du systeme sos et des concentrations minimales detectees, nous avons montre que le salmonella sula-test est plus sensible que le sos chromotest et l'umu-test. Apres introduction des genes constitutifs de la nitroreductase et de l'o-acetyltransferase, la souche de207 a permis de detecter les genotoxiques presents dans les 20 urines de fumeurs testes (melanges complexes). La comparaison de la mutagenese dans le test d'ames et l'induction du systeme sos dans le salmonella sula-test a montre parallelement a une correlation statistiquement significative que ces deux tests sont complementaires pour la detection de genotoxiques

Titre traduit

The Salmonella sulA-TEST : a new in vitro system to detect genotoxicity pounds

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