Clonage et caracterisation d'un gene codant pour une chaine lourde de dyneine axonemale de paramecie

par ABDELLAH HOUARI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Linda Sperling.

Soutenue en 1995

à Paris 11 .

mots clés

Résumé

Les dyneines sont des atpase de haut poids moleculaire, impliquees dans la production d'energie necessaire a la mobilite des cils et flagelles et au transport des vesicules le long des microtubules. Ces enzymes sont composees de plusieurs chaines lourdes qui portent l'activite atpasique et qui sont codees par une famille multigenique tres conservee. Nous avons clone et sequence un nouveau gene qui code pour une chaine lourde de dyneine de paramecium tetraurelia. La sequence nucleotidique contient une phase ouverte de 4143 acides amines interrompue par 2 petits introns de 26 pb chacun localises a l'extremite 3' du gene. L'analyse des sites consensus de liaison de l'atp indique que le produit du gene est une chaine lourde de dyneine axonemale. Une classification phylogenetique des sequences de dyneine disponibles et leur comparaison par matrice de points sont en faveur de l'appartenance de cette chaine polypeptidique aux dyneines du bras interne de l'axoneme. L'etude de ce gene, premier connu pour une chaine lourde de dyneine du bras interne de l'axoneme, devrait contribuer a la definition des fonctions respectives des differentes isoformes, qui demeurent largement inconnues. Des anticorps antipeptides diriges contre le site catalytique de la dyneine ont ete produits. L'un des anticorps obtenus est hautement specifique du grand fragment (huv1) resultant du photoclivage de la dyneine en presence de vanadate a son site catalytique. Ces anticorps, qui reconnaissent toutes les chaines lourdes de dyneine, quelque soit l'isoforme ou l'espece, peuvent contribuer a la caracterisation biochimique et l'etude in situ des dyneines connues et a l'identification de nouveaux membres de cette famille de moteurs moleculaires

Titre traduit

Cloning and caracterisation a anonemal dynein heavy chain gene from paramecium

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