Systemes moleculaires effecteurs dependants et independants de l'oxygene du polynucleaire neutrophile humain dans les mecanismes de l'inflammation associes a la mucoviscidose

Oxygen-dependent and independent microbicidal pathways in human polymorphonuclear neutrophils in cystic fibrosis-induced pulmonary inflammation

• Auteur / Autrice : Véronique Witko-Sarsat
• Direction : Georges Cheymol
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés libres

Sciences medicales

Résumé

L'activite lytique du polynucleaire neutrophile necessaire a la defense de l'hote envers les agents pathogenes fait intervenir des systemes moleculaires complexes et integres aboutissant a la production d'agents microbicides, les oxydants et les proteases, qui constituent respectivement les mecanismes lytiques dependants et independants de l'oxygene. Ainsi le neutrophile, est une cellule au cur du processus complexe de l'inflammation associee a la mucoviscidose. Cette maladie genetique a transmission autosomique recessive est caracterisee par une inflammation precoce et chronique ainsi qu'une colonisation precoce des voies aeriennes par des bacteries. Parmi les mediateurs issus des polynucleaires neutrophiles, les proteases, en particulier l'elastase, sont les principaux acteurs de la destruction du tissu pulmonaire. La premiere approche centree sur les systemes dependants de l'oxygene du neutrophile dans la mucoviscidose, a porte sur les oxydants liberes lors de l'explosion respiratoire du polynucleaire neutrophile. Nous avons montre que les polynucleaires neutrophiles des enfants atteints de mucoviscidose et des sujets heterozygotes pour la mutation du cftr presentent une anomalie constitutive, caracterisee par une capacite accrue a generer des oxydants chlores et de mobiliser leurs granules azurophiles, comme en temoigne leur production extracellulaire accrue de myeloperoxidase. De plus nous avons montre la presence de concentrations elevees de chloramines dans les secretions bronchiques des patients qui, de facon paradoxale sont etroitement correlees avec un meilleur etat clinique des patients, juge sur les test fonctionnels respiratoires et les criteres classiques. La seconde approche centree sur les systemes independants de l'oxygene, a porte sur l'etude des caracteristiques moleculaires et fonctionnelles d'une serine protease, homologue de l'elastase, la proteinase 3 (pr3), autoantigene cible des anticorps anti-cytoplasme de neutrophiles (antineutrophil cytoplasmic antibodies ou anca) dans la granulomatose de wegener. Nous avons exprime une pr3 recombinante dans les cellules d'insectes par le systeme du baculovirus. L'etude de la reconnaissance de cette pr3 recombinante par les anca que nous avons menee en parallele, a permis de reveler de nouvelles informations sur les epitopes de la pr3 reconnue par les autoantigenes