Etude structurale et fonctionnelle de canaux k+ de type shaker, isk et irk

Cloning and characterization of k+ channels belonging to shaker, isk and irk families

• Auteur / Autrice : Florian Lesage
• Direction : Michel Lazdunski
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Nice

Résumé

Les canaux k#+ sont des proteines ubiquitaires responsables du maintien et de la modulation du potentiel electrique de la membrane plasmique. Ils controlent la frequence et la duree des potentiels d'action dans les cellules excitables et l'activite secretrice des cellules exocrines et endocrines. Nous avons clone et etabli la structure primaire de differents canaux k#+: les canaux kv1. 3 et kv1. 5 sont des canaux de type shaker a 6 domaines transmembranaires (s1 a s6) et un segment (h5) implique dans la formation du pore, les canaux a rectification entrante irk3 et couple aux proteines g girk2 possedent deux domaines transmembranaires (m1 et m2) et un segment h5 et enfin, la proteine i#s#k ne possede qu'un seul domaine transmembranaire. Les proprietes biophysiques, pharmacologiques et de regulation de ces canaux ont ete etudiees apres expression heterologue dans l'ovocyte de xenope et dans des cellules en culture. Par ailleurs, il a ete etabli que le courant de type n du lymphocyte t humain est produit par le canal kv1. 3. Ce clone a aussi permis de mettre en evidence un effet de la densite d'expression des canaux k#+ sur leurs proprietes biophysiques et pharmacologiques. Le clonage du canal murin kv1. 5 a permis d'etablir qu'il est le canal a rectification retardee majeur du cur adulte, que son activite est modulee par les acides gras polyinsatures et qu'une variete de canaux kv1. 5 aux proprietes distinctes est generee par epissage alternatif. L'etude de la proteine i#s#k, clonee a partir du lymphocyte humain et du cur de souris, suggere que cette proteine est un regulateur plutot qu'un canal. Cette hypothese est soutenue par l'incapacite d'exprimer un courant i#s#k ailleurs que dans l'ovocyte de xenope et par l'observation que la proteine i#s#k active aussi un canal cl#- dependant du potentiel dans l'ovocyte