Caractérisation génétique et moléculaire d'une glutathion peroxydase séléno-dépendante de Schistosoma mansoni

par Catherine Roche-Lestienne

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Raymond Pierce.

Soutenue en 1995

à Lille 1 .

mots clés

• Glutathion peroxydase
• Schistosoma mansoni
• Schistosomose

Résumé

Le clonage et la caractérisation du gène déterminant la synthèse d'une glutathion peroxydase de Schistosoma mansoni (SmGSHpx) révèlent la présence d'un codon TGA en phase de lecture ainsi qu'une structure secondaire conservée de la région 3' non-codante. Ces deux éléments permettent l'incorporation d'une sélénocystéine au sein de SmGSHpx. La comparaison de la séquence du gène de la SmGSHpx avec celle déterminant la synthèse de la phospholipide hydroperoxyde GSHpx (PHGSHpx) de porc montre 55% d'identité et une organisation génomique très similaire. Par ailleurs, l'élaboration d'une phylogénie moléculaire des GSHpx révèle que ces deux gènes sont étroitement apparentes. Une protéine présentant une activité PHGSHpx a été purifiée chez S. Mansoni. Elle est reconnue par des anticorps dirigés contre l'extrémité C-terminale de la SmGSHpx. L'expression in vitro de la SmGSHpx a été réalisée au sein de cellules d'insectes. Cette protéine recombinante est enzymatiquement inactive. In vivo, la localisation unique de la SmGSHpx dans les cellules vitellines de la femelle est mise en évidence. La protéine n'est pas retrouvée chez la larve malgré la présence de l'ARNm spécifique à ce stade. Une approche dans l'analyse fonctionnelle de la région promotrice de la SmGSHpx a été réalisée.

Titre traduit

Molecular and genetic characterization of a selenodependent glutathione peroxidase of Schistosoma mansoni

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