La cyclophiline B et son récepteur membranaire : implications dans la sensiblité lymphocytaire à la cyclosporine a

par Fabrice Allain

Thèse de doctorat en Biochimie analytique structurale et métabolique

Sous la direction de Geneviève Spik.

Soutenue en 1995

à Lille 1 .

mots clés

• Ciclosporine
• Immunosuppresseurs
• Protéines

Résumé

Les cyclophilines sont des protéines qui en fixant la cyclosporine A (CsA), un puissant immunosuppresseur utilisé pour prevenir le rejet des greffes, forment un complexe qui inhibe l'activation ca#2#+-dependante du lymphocyte t. La cyclophiline A (CyPA) est une protéine cytosolique qui représente la cible prioritaire de l'action de la CsA. Par contre, le rôle dans l'immunosuppression de la cyclophiline B (CyPB), isoforme localisée dans les vésicules du réticulum endoplasmique, n'a pas encore été élucidé. Elle pourrait intervenir dans les phénomènes de sensibilité cellulaire à la CsA, en modifiant son incorporation et sa distribution dans les cellules du sang. Afin de vérifier cette hypothèse, la distribution relative de la cypa et de la CyPB dans les cellules du sang a été étudiée. L'utilisation d'anticorps anti-peptides copiant les régions non homologues des deux protéines a permis de mettre au point un dosage elisa spécifique de chaque isoforme, et de montrer que la CyPB est peu représentée dans les lymphocytes et qu'elle est sécrétée dans le plasma. L'étude des interactions de la CyPB avec les lymphocytes T a révélé une fixation spécifique, saturable et réversible de la protéine radiomarquée, avec un kd de 12 nm et un nombre de sites de 35. 10#3 pour les cellules t jurkat. À 37°C, la protéine est endocytée, puis relarguée dans le milieu sous forme dégradée. La CsA n'inhibe ni la fixation de la CyPB, ni le processus d'endocytose. Comme la CyPB libre, le complexe CyPB/CsA tritiée se fixe à la surface des lymphocytes T, avec un kd et un nombre de sites équivalents. Il est internalisé à 37°C, mais contrairement à la cypb, la csa s'accumule dans la cellule, favorisant un ciblage du médicament vers les lymphocytes T. De plus, le complexe cypb/csa est capable d'inhiber l'activation et la prolifération lymphocytaire.

Titre traduit

The cyclophilin B and its membrane receptor : involvement in sensitivity to cyclosporin A

Pas de résumé disponible.