Etude de la tubuline gamma : mise en évidence de deux formes aux propriétés biochimiques différentes chez le myxomycète Physarum polycephalum
par Isabelle Lajoie-Mazenc
Thèse de doctorat en Biologie cellulaire
Sous la direction de Michel Wright.
Soutenue en 1994
à Toulouse 3 .
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Résumé
Les microtubules constituent l'un des elements essentiels des cellules eucaryotes et interviennent dans la mitose et dans les fonctions du cytosquelette. Ils sont formes par l'assemblage d'heterodimeres constitues par deux proteines homologues, les tubulines alpha et beta. Bien que les heterodimeres de tubulines purifies soient capables de s'assembler in vitro, les microtubules in vivo sont toujours assembles sur des structures appelees centres organisateurs des microtubules (mtoc). Plusieurs proteines des mtocs ont ete caracterisees, mais les mecanismes de nucleation des microtubules sont encore inconnus. Cependant, une nouvelle tubuline, la tubuline gamma est necessaire pour la nucleation des microtubules. Dans une premiere partie, nous avons obtenu quatre anticorps diriges contre trois sequences de la tubuline gamma. Dans une deuxieme partie, nous avons mis en evidence deux isoformes de la tubuline gamma chez le myxomycete physarum polycephalum. Ces deux isoformes possedent des proprietes biochimiques differentes. Dans une troisieme partie, nous avons montre la presence des deux isoformes pendant tout le cycle cellulaire a l'interieur des noyaux de plasmode. Nous avons demontre que les elements nucleants des mtocs mitotiques suivent un cycle d'agregation et desagregation au cours du cycle cellulaire. Dans une derniere partie, nous avons montre que la presence de tubuline gamma n'est pas limitee au niveau des poles du fuseau mitotique des cellules de mammiferes, mais aussi presente a l'interieur du fuseau mitotique. Ce travail apporte de nouvelles donnees sur la tubuline gamma: 1) presence d'isoformes aux proprietes biochimiques differentes 2) localisation de la tubuline gamma le long des microtubules du fuseau mitotique 3) presence de tubuline gamma en l'absence de toute nucleation des microtubules
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Titre traduit
Gamma tubulin: presence of two isoforms of gamma tubulin exhibiting different biochemical properties in the myxomycete physarum polycephalum
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