Expression de la protease nexine-1 chez la souris durant l'organogenese et le developpement du systeme nerveux et chez les souris transgeniques thy-1/pn-1

par ISABELLE MANSUY

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées

Sous la direction de Pierre Gerlinger.

Soutenue en 1994

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008) .

mots clés

Résumé

La protease nexine-1 (pn-1) aussi connue sous le nom de glia-derived nexine est une glycoproteine de 43 kd capable d'inhiber l'activite de plusieurs serine proteases comme la thrombine, l'activateur tissulaire du plasminogene, l'urokinase et la trypsine. En culture, pn-1 est synthetisee et secretee par de nombreux types cellulaires et peut induire la croissance des neurites grace a son action inhibitrice sur la thrombine. In vivo, l'expression de pn-1 augmente dans le systeme nerveux central (snc) et peripherique apres differentes sortes de lesion. Pour tenter de comprendre le role de pn-1 in vivo, son expression spatiale et temporelle a ete etudiee chez la souris. Durant le developpement embryonnaire et postnatal ainsi que chez l'adulte, l'arnm et la proteine de pn-1 sont largement exprimes dans le cerveau par plusieurs types de neurones et de cellules gliales ainsi que dans de nombreux autres organes et tissus. Les cellules microgliales du cerveau en particulier, contiennent de grandes quantites de proteine pn-1. L'analyse de l'expression spatiale et temporelle controlee de pn-1 suggere un role pour pn-1 dans le developpement, la maturation et la stabilisation des connections dans le systeme nerveux ainsi que dans le controle de la proteolyse dans plusieurs tissus en plus du cerveau. De plus, d'une part, afin de perturber la balance protease/inhibiteur de protease, pn-1 a ete surexprime dans le snc de souris transgeniques grace aux sequences regulatrices du gene thy-1 de souris. Plusieurs lignees de souris transgeniques thy-1/pn-1 ont ete generees et analysees en detail. De grandes quantites d'arnm et de proteine du transgene ont ete detectees, principalement dans les neurones du snc des cerveaux postnataux et adultes de souris thy-1/pn-1. La surproduction de pn-1 chez les souris transgeniques n'a produit aucune anormalite structurelle, physiologique ni aucune modification du comportement. Cependant, de recentes analyses electrophysiologiques ont revele une modification de la plasticite synaptique. D'autre part, afin de generer des souris transgeniques comportant une mutation dite nulle dans le gene pn-1, un fragment du gene pn-1 a ete clone et sequence pour construire un vecteur utilisable en recombinaison homologue. Enfin, la regulation de l'expression de pn-1 a ete etudiee in vitro dans plusieurs lignees cellulaires, et des resultats preliminaires ont indique que les niveaux d'arnm et de proteine de pn-1 sont en partie regules par l'acide retinoique

Titre traduit

Protease nexin-1 expression during mouse organogenesis and nervous system development and in transgenic thy-1/pn-1 mice

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