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Thèse soutenue

Thiorédoxines cytoplasmiques de Nicotiana tabacum : caractérisation biochimique, immunodétection et tests fonctionnels

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Auteur / Autrice : Paulo Marinho
Direction : Yves Meyer
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Physiologie et biologie moléculaire végétales
Date : Soutenance en 1994
Etablissement(s) : Perpignan

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Thiorédoxine
Protéines recombinées
Nicotiana tabaccum

Résumé

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Les thioredoxines sont des oxydoreductases presentant un site actif caracteristique try cys gly pro cys. Elles existent chez tous les organismes et participent a des reactions multiples comme agents reducteur d'autres proteines. Chez les vegetaux, deux types de thioredoxines sont connues, cytoplasmiques (h-heterotophes) ou chloroplastiques, classees selon leurs compartimentation dans la cellule. L'objectif de notre travail etait de mieux caracteriser la thioredoxine h1 de tabac. Trois approches ont ete choisis: la production de la proteine dans e. Coli, afin de confirmer l'activite enzymatique, la production d'anticorps afin de la detecter dans la plante et dans les cultures de cellules et la construction de plantes transgeniques afin de progresser vers sa fonction. Nous avons demontre que la thioredoxine h1 presente une activite typique de thioredoxine activatrice de la mdh in vitro. L'etude par western blots de tissus vegetaux a montre que la proteine n'est presente que dans les cals et dans la suspension cellulaire, bien que les arn messagers soient presents dans tous les tissus meristematiques. Les plantes transgeniques obtenues, ne presentent aucun phenotype, la construction sens ayant ete perdue lors du transfert ou la construction antisens etant incapable de bloquer la synthese de la proteine. Ces resultats suggerent que la synthese de la thioredoxine h1 est necessaire a une etape de la vie cellulaire ou de la regeneration de plantes, et qu'elle doit etre bloquee a d'autres etapes