Étude des propriétés biochimiques et immunologiques de la Leucine Amino-peptidase purifiée d'Eimeria falciformis

par Madjanakoma Kaga

Thèse de doctorat en Génie Enzymatique, Bioconversion, Microbiologie

Sous la direction de Pierre Péry.

Soutenue en 1994

à Compiègne , dans le cadre de École doctorale 71, Sciences pour l'ingénieur (Compiègne) .

mots clés

• Leucine Aminopeptidases
• Eimeria falciformis
• Colonne d'affinité
• Bestatine
• Leucine
• Anticorps monoclonaux
• Ubénimex
• Immunologie
• Biochimie

Résumé

Les coccidioses sont des maladies parasitaires qui ont des répercussions économiques importantes en élevage avicole. Actuellement peu de moyens permettent de contrôler ces coccidioses. L'étude de la LAP d'Eimeria falciformis pourrait permettre la compréhension des interactions entre le parasite et la cellule hôte couvrant ainsi de nouvelles approches pour la vaccination contre le parasite ou le diagnostic de la maladie. Cette enzyme pourrait aussi constituer une cible nouvelle pour une chimiothérapie. A l'aide d'une colonne d'affinité et de filtration sur gel nous avons purifie une LAP de quarante cinq a cinquante kDa qui a une activité sur la L-Leucine-p-nitro-anilide à pH huit ; c'est une métalloprotéine inhibée par la bestatine (deux cent dix micromoles). Un sérum polyclonal anti-LAP a permis d'isoler dans la banque d'E. Acervulina des clones contenant une insertion de mille cinq cent paires de bases, mais la séquence de ceux-ci n'a pas encore été réalisée. Il reconnait en immunofluorescence indirecte des protéines localisées dans le cytoplasme et, de plus, inhibe l'activité LAP de quatre vingt douze pour cent. Un des anticorps monoclonaux anti-LAP que nous avons obtenus, reconnait en immuno-empreinte la bande de cinquante kDa correspondant à la LAP. Ces résultats encourageants suggèrent que l'on pourrait transposer cette même étude à la coccidie de la poule et faire des essais de vaccination.

Titre traduit

Biochemical and immunological analyses of the Leucine Aminopeptidase purified from Eimeria falciformis

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