Étude de la protéine majeure de surface des sporozoïtes d'"Eimeria falciformis" : purification à l'aide d'anticorps monoclonaux, caractérisation immunologique et biochimique : induction d'une protection par voie orale après incorporation dans des ISCOMs

par Mirdad Kazanji

Thèse de doctorat en Sciences biologiques. Relations hôtes-parasites

Sous la direction de Pierre Péry.

Soutenue en 1993

à Paris 12 .

mots clés

• Protéines membranaires
• Immunostimulation
• Immunité
• Anticorps monoclonaux

Résumé

Des anticorps monoclonaux (acmo) ont ete obtenus par immunisation de souris avec des broyats de sporozoites d'e. Falciformis. Comme un nombre important d'entre eux reconnaissaient une proteine de masse molaire 27kda a la surface du sporozoite, cette proteine a ete appelee proteine majeure de surface du sporozoite d'e. Falciformis (p27). Cette proteine a ete purifiee par immunoaffinite a l'aide d'un des anticorps monoclonaux (d14. 5) et d'autres acmo ont ete obtenus contre la molecule purifiee. L'etude de la reconnaissance de la p27 par les differents acmo en elisa competitifs ou dans le systeme biacore a permis la definition sur la molecule de deux epitopes distincts dont l'un est vraisemblablement repetitif. Les deux epitopes retrouves sur la proteine p27 sont des epitopes communs a des proteines de masse molaire 25kda des deux especes de coccidies de poule, e. Tenella et e. Acervulina. Dans les trois types de sporozoites, ces epitopes sont retrouves a la surface des sporozoites, mais aussi dans les globules refringents. Cette proteine qui possede une activite esterase-lipase et qui est ancree dans la membrane par une ancre gpi est capable de stimuler la transformation lymphoblastique de cellules de ganglions mesenteriques provenant d'animaux infectes. Elle est de plus la cible de reactions de lyse de sporozoites par les phagocytes. Par la suite cette proteine a donc ete utilisee pour declencher une immunite intestinale en incorporant l'antigene dans des iscoms et en l'administrant par voie orale. La proteine administree ainsi induit d'une part une immunite locale (humorale et cellulaire). Elle induit d'autre part l'acquisition par les souris d'une protection contre une infection ulterieure contre le parasite

Titre traduit

The major surface protein of "Eimeria falciformis" sporozoites : purification with monoclonal antibodies, immunological and biochemical properties : protection by oral immunisation after entraptment in ISCOMs

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