Performances des tests d'Ames et micronoyaux triton appliqués à l'étude de la génotoxicité d'effluents complexes et des interactions entre polluants

par Fabrice Godet

Thèse de doctorat en Toxicologie de l'environnement

Sous la direction de Paule Vasseur.

Soutenue en 1993

à Metz .

mots clés

• Test d'Ames
• Test triton
• Génotoxicité
• Toxicologie génétique
• Pleurodèles
• Eau -- Pollution par les métaux lourds

Résumé

Dans une première partie nous avons réalisé une revue bibliographique des essais de génotoxicité in vitro et in vivo applicables à l'étude de la génotoxicité d'échantillons de l'environnement hydrique. Dans une seconde partie nous avons comparé les performances du test d'Ames et du test triton sur larves de pleurodèle, dans le cadre du contrôle de la génotoxicité d'effluents complexes. Le test triton s'est révélé un outil de choix pour la détection du potentiel génotoxique de ces échantillons. Ce test est apparu : 1) sensible sans nécessiter d'étape d'extraction et de concentration des micropolluants ; 2) plus représentatif des conditions d'exposition dans l'environnement ; 3) facile à mettre en oeuvre, mais il gagnerait à ce que la lecture des frottis soit automatisée. Le test d'Ames nécessite le plus souvent une concentration des échantillons testés ; il est bien adapté pour tester de faibles volumes d'échantillon. Il s'est avéré plus particulièrement sensible aux micropolluants des effluents de papeterie. Dans une troisième partie nous avons étudié les effets combinés de FeIII CrIII, CrVI et ZnII sur l'induction de cellules à micronoyaux chez les larves de triton. Les résultats obtenus sont les suivants : 1) le fer trivalent est génotoxique ; 2) le chrome III et le chrome VI ne sont pas systématiquement génotoxiques ; 3) un effet d'additivité a été mis en évidence entre FeIII et CrVI ; 4) le zinc n'est pas génotoxique. Enfin nous avons étudié le mécanisme d'action génotoxique du ferIII. Celui-ci pourrait être lié à l'induction d'un stress oxydant ainsi que le suggère le taux de cellules à micro-noyaux induit par FeIII, fortement augmenté par le cyanure (Fe (0,6 mg/l)/Cn (5 et 25 mg/l), qui agit en perturbant le métabolisme oxidatif des cellules

Titre traduit

The Ames test and the micronucleus test on newt for studying wastewaters genotoxicity and interactions between pollutants

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Résumé

We have compared the Ames test and the micronucleus abilities to detect the genotoxic potentiality of wastewaters. The micronucleus test on newt is agood tool for detecting the genotoxic potentialities of these kind of samples. This test is (1) sensitive, it does not need any extraction or concentration step of micropolluants ; (2) representative of environnemental conditions exposure ; (3) and easy to used. But, it should be necessary to automate the smaers counting. On the contrary the Ames test generally needs a concentration step to detect the genotoxicity of wastewter. This test is well adapted for genotoxicity screening and for small volumes of samples. We have studied the combined effects of FeIII CrIII, CrVI and Zn in the induction of micronucleated cells newt larvae. Our results are the following : 1) trivalent iron is genotoxic, 2) CrIII and CrVI are not systematically genotoxic, 3) an additive genotoxic effect has been observed when FeIII and CrVI are combined, 4) zinc is not genotoxic. Finally we have studied the genotoxic mecanism of iron. FeIII could induce an oxidative stress responsible for DNA damages. Indeed, the micronucleated cells level induced by trivalent iron is enhanced when the newt larvae are simultaneously exposed to non genotoxic concentrations of cyanide, this compound is known to modify the oxidative metabolism of the cells