Thèse soutenue

Isolement et caracterisation de la region de replication du plasmide lactose-protease pucl22 de lactococcus lactis subsp. Lactis cnrz270
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Auteur / Autrice : Jacques Frère
Direction : Madeleine Novel
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Caen

Résumé

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Le replicon minimum rep22 du plasmide lactose-protease pucl22 (54 kb) de lactococcus lactis subsp. Lactis crnz270 a ete isole sur un fragment de 1812 pb. Il est constitue de deux regions essentielles a la replication: l'origine (ori) portant deux sequences homologues aux boites dnaa d'e. Coli et trois iterons suivis d'un quatrieme incomplet; le gene rep22a codant la proteine rep22a (388 a. A. ) active en trans. La replication est initiee dans la region ori et progresse de facon bidirectionnelle suivant un mecanisme theta. Rep22a inhibe l'expression du gene cat de pc194 chez lc. Lactis en se fixant sur sa region promotrice, et doit inhiber sa propre expression. De nombreux plasmides de bacteries lactiques hybrident avec une sonde specifique rep22; certains sont coresidents. Des plasmides possedant une forte similarite de sequence avec rep22 sont compatibles avec ce replicon. Cette compatibilite plasmidique pourrait resulter d'une adaptation du couple iteron-proteine de replication de chaque plasmide permettant l'existence de souches multiplasmidiques portant plusieurs replicons de cette famille. Le nombre de copies par cellule du replicon rep22 varie suivant la souche de lactocoque qui l'abrite. Ce replicon segrege au hasard, ou moins bien qu'au hasard suivant la souche de lactocoque qui l'abrite, signifiant l'absence d'un systeme de partition active dans cette region d'adn. Un tel systeme est detecte chez le plasmide lactose-protease parental qui possede un nombre de copies voisin de celui du chromosome