Etude de la composition lipidique de la membrane vacuolaire d'acer pseudoplatanus. Determination de la distribution transmembranaire de la phosphatidylcholine et de la phosphatidylethanolamine

Study of the lipidic composition of the vacuolar membrane of acer pseudoplatanus. Transbilayer distribution of phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine

• Auteur / Autrice : ERIC TAVERNIER
• Direction : KHAN LE QUOCK
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Besançon

Résumé

Chez les plantes superieures, la vacuole participe aux fonctions vitales de la cellule. Les fonctions de cet organite sont assurees principalement par la membrane vacuolaire (tonoplaste). Notre travail a eu pour objectif d'etudier la composition lipidique du tonoplaste de cellules isolees d'acer pseudoplatanus l. . Le tonoplaste renferme des phospholipides, des glycolipides et des lipides neutres qui representent respectivement 44,5%, 39,1% et 16,4% des lipides totaux. Les sterols, dont 75% sont sous forme glycosylee, constituent environ 1/3 des lipides du tonoplaste. Les lipides majeurs sont la phosphatidylethanolamine (pe), la phosphatidylcholine (pc), un ceramide monohexoside et les sterols glycosyles. L'acide palmitique (16:0) et l'acide linoleique (18:2) constituent 60 a 80% des acides gras des phospholipides. L'hydrolyse acide des glycolipides ne libere qu'un sucre: le glucose. L'etude des activites phospholipasiques associees au tonoplaste, realisee a partir de phospholipides radioactifs, a permis de mettre en evidence la presence de phospholipases a#1 et d. La phospholipase a#1 est associee a la face cytoplasmique de la vacuole et presente un ph optimum voisin de 6. Elle n'est pas calcium dependante mais presente une activite maximale en presence de ca#2#+. La determination de la distribution transversale de la pc et la pe dans le tonoplaste a ete realisee a l'aide de reactifs chimiques (trinitrobenzenesulfonate, fluorescamine) et des phospholipases a#2, c et d. Seule l'utilisation simultanee de la phospholipase a#2 et de la phospholipase c a permis de montrer que pe est approximativement 20% plus abondante dans le feuillet externe que dans le feuillet interne et que pc est distribuee d'une facon symetrique entre les deux feuillets