Caractérisation d'une famille de protéines nucléolaires impliquées dans la maturation du pré-ARNr chez la levure

par Jean-Philippe Girard

Thèse de doctorat en Biologie moléculaire

Sous la direction de François Amalric.

Soutenue en 1992

à Toulouse 3 .

mots clés

• Glycine (acide aminé)
• Arginine
• ARN
• Protéines -- Aspect génétique
• Levure (agent de fermentation) -- Génétique

Résumé

Les principales etapes de la biogenese des ribosomes se deroulent, dans les cellules eucaryotes, au sein d'une structure nucleaire dynamique, le nucleole. Les proteines nucleolaires non-ribosomiques, specifiquement localisees dans le nucleole, jouent probablement un role cle dans la transcription et la maturation des molecules d'arn ribosomique (arnr), dans l'assemblage des particules pre-ribosomiques et dans l'export des sous-unites ribosomiques nouvellement synthetisees vers le cytoplasme. Trois proteines nucleolaires, la nucleoline chez les vertebres, la fibrillarine chez les eucaryotes superieurs et inferieurs et ssb1 chez saccharomyces cerevisiae, contiennent un domaine caracteristique riche en acides amines glycine et arginine, le domaine gar (pour glycine-arginine riche). Intrigues par la presence du domaine gar dans trois proteines qui ont une localisation commune, nous avons pense qu'il pouvait exister un lien entre la presence de ce domaine et la fonction de ces proteines. Nous avons alors entrepris d'isoler les genes codant pour les proteines a domaine gar (proteines gar) chez la levure, d'etudier la localisation de ces proteines au sein de la cellule et de determiner le role de ces proteines dans la biogenese des ribosomes in vivo. Nous avons isole un gene de s. Cerevisiae codant pour une nouvelle proteine a domaine gar, la proteine gar1. La proteine gar1 est localisee dans le nucleole de levure et est essentielle a la vie cellulaire. De plus, la proteine gar1 est associee a deux petits arn nucleolaires impliques dans la maturation du pre-arnr et l'etude du phenotype d'un mutant conditionnel a revele que la proteine gar1 est requise pour les premieres etapes de maturation du pre-arnr et que son absence inhibe la production de l'arnr 18s. La caracterisation de la famille des proteines nucleolaires a domaine gar a ete egalement effectuee dans une autre espece de levure, schizosaccharomyces pombe, tres differente morphologiquement et tres eloignee phylogenetiquement de saccharomyces cerevisiae. Cette etude a permis d'isoler les genes de s. Pombe codant pour les proteines fibrillarine, gar1 et gar2/nsr1 et a revele la conservation structurale et fonctionnelle des proteines nucleolaires a domaine gar, au cours de l'evolution

Titre traduit

Gar proteins: a conserved family of nucleolar proteins required for pre-rrna processing in yeast

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