Determination de la structure tridimensionnelle de l'aldose reductase de cristallin de porc

Structure determination of pig lens aldose reductase

• Auteur / Autrice : Frédérique Favier
• Direction : Dino Moras
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Strasbourg 1

Résumé

L'aldose reductase est une deshydrogenase monomerique a nadph de 36kda qui catalyse la reduction d'une grande variete d'aldehydes et de cetones en leur alcool correspondant. Elle est impliquee dans la voie des polyols, une voie mineure du metabolisme du glucose. Sous conditions hyperglycemiques, l'etape impliquant l'aldose reductase s'intensifie, entrainant une accumulation du sorbitol dans les cellules, qui se manifeste par l'apparition de complications variees du diabete, comme la cataracte ou les neuropathies. L'inhibition de l'enzyme apparait comme une approche efficace pour la prevention de ces complications. La connaissance de la structure tridimensionnelle de l'enzyme est dans ce cas tres interessante. La structure de l'aldose reductase de cristallin de porc a ete determinee a partir de deux formes cristallines, l'une triclinique contenant l'apo-enzyme, l'autre tetragonale contenant l'holoenzyme. Le probleme de la phase a ete resolu dans la forme triclinique grace a la preparation d'un derive mercuriel, et l'utilisation des methodes de modification de densite. Le modele atomique a ete construit, puis affine a 2. 5 angstroems. Il a ete positionne dans la maille tetragonale grace aux techniques du remplacement moleculaire, puis a ete affine a 3 angstroems. La structure de l'aldose reductase est inattendue pour un enzyme a nadph, puisqu'elle ne contient pas le repliement de rossmann, mais un motif en tonneau alpha/beta. L'examen de la structure a permis de decrire le site de fixation du nadph