Adn ligases chez les eucaryotes superieurs

Dna ligases in higher euckaryotic cells

• Auteur / Autrice : Said Aoufouchi
• Direction : Michel Philippe
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Rennes 1

Résumé

L'adn ligase i humaine est une proteine de 130 kda, tres sensible aux phenomenes de proteolyse et genere plusieurs produits de degradation qui conservent une activite adn ligase. Des difficultes d'ordre quantitatifs et qualitatifs, nous ont amene a changer le modele experimental pour purifier cette enzyme. Notre choix s'est porte sur l'uf de l'amphibien xenopus laevis du fait de sa grande disponibilite, et sa richesse en enzymes liees a la replication de l'adn. L'adn ligase i du xenope est une proteine 180 kda egalement sujette aux phenomenes de proteolyses qui generent majoritairement deux polypeptides de 130 et 76 kda. La purification du polypeptide 180 kda nous a permis de preparer des anticorps specifiques. L'adn ligase i du xenope est une enzyme nucleaire, presente des le premier stade de l'ovogenese et qui s'accumule progressivement jusqu'au stade v. Sa quantite demeure constante au moins jusqu'au stade bourgeon caudal. L'adn ligase ii de xenope est une proteine de poids moleculaire apparent de 80 kda. Elle n'est pas reconnue par les anticorps anti-adn ligase i. Elle est presente dans les ovocytes, les ufs vierges et apres la fecondation. Nous avons montre de facon claire que contrairement a ce qui etait decrit dans la litterature l'adn ligase i chez les deux amphibiens axolotl et pleurodele est presente avant la fecondation. Ceci est egalement vrai chez l'oursin