Role de la tyrosine 143 du flavocytochrome b2 (l-lactate deshydrogenase) dans la catalyse et le transfert d'electrons

par NATHALIE ROUVIERE-FOURMY

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Florence Lederer.

Soutenue en 1992

à Paris 11 .

mots clés

Résumé

Ce travail a pour but l'etude du role de la tyrosine 143 du flavocytochrome b2 dans la catalyse et le transfert d'electrons flavine-heme. Au moyen de differentes techniques d'etudes cinetiques, ainsi que de la mesure de l'effet isotopique primaire du deuterium et du tritium, nous avons pu etudier les consequences de la substitution, par mutagenese dirigee, de la tyrosine 143 en une phenylalanine. Nous avons ainsi mis en evidence que la tyrosine 143 intervient dans la stabilisation du complexe de michaelis, par l'intermediaire d'une liaison hydrogene avec le carboxylate du substrat ainsi que le suggerait la structure cristallographique de l'enzyme. Le role le plus important de la tyrosine se situe neanmoins au niveau du transfert intramoleculaire d'electrons entre la flavine et l'heme. En assurant une liaison hydrogene avec le propionate de l'heme, l'hydroxyde phenolique 143 permettrait a l'interface entre les deux domaines fonctionnels de s'etablir correctement. La mobilite du domaine hemique semble etre essentielle au bon fonctionnement de l'enzyme

Titre traduit

Role of tyrosine 143 of flavocytochrome b2 (l-lactate dehydrogenase) during catalysis and electron transfer from flavin to heme

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