Immortalisation de chondrocytes articulaires de lapin par les fonctions precoces du virus sv40. Etude de la modulation des fonctions differenciees

Immortalization of rabbit articular chondrocytes by sv40 early functions. Modulation of differentiated functions

• Auteur / Autrice : Sophie Thenet
• Direction : Monique Adolphe
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Nous avons etabli des lignees de chondrocytes articulaires de lapin en utilisant le pouvoir immortalisant de certains oncogenes, puis, nous avons etudie la possibilite chez les chondrocytes immortalises d'exprimer ou de reexprimer les fonctions specifiques du cartilage. La transfection de chondrocytes articulaires de lapin en primoculture par un plasmide portant les fonctions precoces de sv40 nous a permis d'isoler plusieurs clones de chondrocytes immortalises. Ces cellules s'expriment l'antigene grand t de sv40, presentent un caryotype hypotetraploide et une tumorigenicite faible chez la souris nude. Elles expriment un phenotype dedifferencie caracterise par l'absence de synthese de matrice colorable par le bleu alcian et de collagene de type ii, et par la synthese de collagenes genetiquement distincts. L'analyse par northern blot montre que l'inhibition du collagene de type ii se situe au niveau transcriptionnel. Les conditions de culture qui permettent a des chondrocytes normaux dedifferencies de reexprimer le collagene de type ii de facon majoritaire n'entraine pas de reexpression de collagene de type ii par les chondrocytes immortalises. La transfection de chondrocytes fraichement isoles du cartilage avec les fonctions precoces de sv40, et la selection des cellules immortalisees en culture en agregats, a conduit a des resultats identiques. Nous montrons donc que l'immortalisation des chondrocytes articulaires de lapin par les fonctions precoces de sv40 entraine une perte apparemment irreversible de l'expression du phenotype differencie des chondrocytes, qui ne necessite pas la transformation complete des cellules