Proprietes fonctionnelles du canal na. Analyse electrophysiologique et pharmacologique

Gating and pore properties of the na channel probed by pharmacological agents

• Auteur / Autrice : JOELLE TANGUY
• Direction : ALAIN MARTY
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Ce travail presente l'etude electrophysiologique des proprietes du canal na et de leurs modulations par des agents pharmacologiques qui activent le canal, comme la batrachotoxine (btx), ou qui le bloquent, comme les anesthesiques locaux (al). La premiere partie concerne le role de l'etat conformationnel du canal dans son interaction avec la btx, et les agents qui suppriment l'inactivation na rapide. Avant suppression de l'inactivation rapide, la btx ne modifie que l'etat ouvert du canal, apres suppression de l'inactivation rapide, elle modifie aussi l'etat inactive lent, environ cinq cent fois plus lentement que l'etat ouvert. L'etude comparative des proprietes du canal apres suppression de l'inactivation rapide par divers agents pharmacologiques, a demontre que ces agents agissent par des mecanismes differents, et apporte la premiere demonstration du decouplage de l'inactivation na rapide et de l'immobilisation des charges intramembranaires. La deuxieme partie decrit le role de l'etat conformationnel et des proprietes de pore du canal dans son interaction avec les al. La specificite d'action des al une fois etablie, le role relatif des mecanismes d'activation et d'inactivation dans le blocage du canal a ete determine: l'activation stabilise le complexe canal-al aux potentiels negatifs, l'inactivation rapide le stabilise aux potentiels positifs. Le role des proprietes de pore du canal dans le blocage des al fut teste par la btx, qui modifie specifiquement le vestibule interne du canal. L'etude systematique de la modulation par les protons internes et externes de la sensibilite au potentiel de membrane du blocage des al a montre que les protons externes et internes interagissent differemment avec la molecule d'al liee au canal, et conduit a l'elaboration d'un nouveau modele (modele a double deprotonation), dans lequel le pka de la molecule liee au canal differe du pka de la molecule en solution