Étapes en biotechnologie : contributions à l'étude de Clostridium acetobutylicum, Saccharomyces cerevisiae et Bacillus subtilis

par Alain Vertès

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Roger Tailliez.

Soutenue en 1991

à Lille 1 .

mots clés

• Clostridium -- Génétique moléculaire
• Saccharomyces cerevisiae -- Génétique moléculaire
• Bacillus subtilis -- Génétique moléculaire

Résumé

Au cours de cette étude, un phage filamenteux défectif de C. Acetobutylicum qui existe sous forme simple brin a été isolé, et une méthode d'isolement d'ADN spécifique pour la forme simple brin a été mise au point à partir des techniques d'électroporation. L'utilisation de levures marquées de S. Cerevisiae pour le levurage de jus de fermentation a été vérifiée en conditions réelles de vinification (50 hl). Quatre technologies différentes de vinification ont été étudiées; il apparaît que seule la fermentation par macération carbonique pose le problème de l'établissement de la souche sélectionnée. L'intérêt du séquençage intégral du génome de B. Subtilis a été illustré. Les gènes narA et thiC ont été clonés par des moyens génétiques et plusieurs phages lambdaFixII recombinants contenant des inserts chromosomiques de B. Subtilis ont été isolés. L'un de ces phages a été séquencé qui contient les gènes narA et spoIID, une ORF identique à 50% à l'ORF R (rev-4) de B. Subtilis, les sous-unités F1 et b de l'ATPase, et un gène qui pourrait être celui de la sous-unité gamma de l'uréase. Ce travail a également permis le clonage d'une protéine biotinylée de B; subtilis, la détection d'une nouvelle protéase et l'identification d'une tyrosine tRNA synthétase secondaire. En outre, il apparaît que les gènes narA et spoIID sont situés à proximité l'un de l'autre

Titre traduit

Steps in Biotechnology : contributions to the study of Clostridium acetobutylicum, Saccharomyces cerevisiae, and Bacillus subtilis

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