Localisation des activités IPP-isomérase et prényltransférases dans les cellules de Vitis vinifera cv Muscat de Frontignan cultivées in vitro

par Gilles Feron

Thèse de doctorat en Biologie et technologie végétales

Sous la direction de Christian Ambid.

Soutenue en 1991

à Toulouse, INPT .

mots clés

• Cellules végétales
• Monoterpènes
• Dimethylallyltransferase

Résumé

L'isopentenyl pyrophosphate isomerase et les prenyltransferases, enzymes clefs de la voie de biosynthese des terpenoides sont etudiees dans le but d'identifier les facteurs responsables de l'absence d'accumulation de monoterpenes chez des suspensions cellulaires de vitis vinifera cv muscat de frontignan. Ces enzymes peuvent etre impliquees dans la voie de biosynthese des terpenoides mais aussi des steroides. La localisation subcellulaire de ces enzymes est realisee a partir de protoplastes de raisin muscat obtenus par digestion enzymatique de la paroi cellulaire. Les resultats demontrent que les activites ipp-isomerase et prenyltransferases sont localisees surtout dans le cytosol, mais aussi dans une fraction membranaire obtenue apres purification d'un culot brut sur gradient de saccharose ou de percoll. L'examen approfondi de cette fraction a l'aide d'enzymes marqueurs des mitochondries, des microbodies et des plastes, revele une origine plastidiale. Des observations de cette fraction en microscopie electronique montrent que les plastes purifies sur gradient de percoll sont intactes. De plus des incubations de la fraction soluble et de la fraction plastidiale en presence de (1-#1#4c)ipp demontrent la presence de deux activites prenyltransferases: une geranyl pyrophosphate synthetase dans le plaste et une farnesyl pyrophosphate synthetase dans le cytosol. La compartimentation specifique de ces enzymes peut etre une explication pour la perte de production de monoterpenes observee chez des cellules cultivees in vitro. Le probleme de la sequestration de la gpp synthetase au sein des plastes, lie a la permeabilite des organites pour les substrats de l'enzyme est aborde

Titre traduit

Localization of IPP-isomerase and phenyltransferase activities in cells of Vitis vinifera cv Muscat de Frontignan cultivated in vitro

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