Métabolisme des β-glucosides aromatiques chez Erwinia chrysanthemi souche 3665 : étude génétique et moléculaire des gènes arb

par Mohammed El Hassouni

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et microbiologie

Sous la direction de Jean-Claude Patte, Marc Chippaux et de Frédéric Barras.

Soutenue en 1991

à Aix-Marseille 2 .

mots clés

• Gènes
• Entérobactéries

Résumé

Erwinia chrysanthemi, contrairement à e. Coli, est capable d'utiliser les b-glucosides naturels comme source de carbone. Deux systèmes cataboliques en sont responsables, système 1b responsable du catabolisme de l'arbutine, la salicine et le cellobiose, et système arb responsable de l'utilisation de la salicine et de l'arbutine. Les gènes arb ont été clonés à partir d'une banque génomique d'erwinia chrysanthemi (souche 3665). Le fonctionnement du systeme arb nécessite les protéines générales pts (hpr et ei) et le complexe ampc-cap. L'analyse des protéines hybrides arb-bgal, l'expression des gènes arb dans un système minicellules, et leur séquence nucléotidique montrent l'existence de trois gènes, arbg, arbf (permease eii specifique dépendante de pts); et arbb (phospho-b glucosidase, localisés sur un fragment de 4,6 kb. Par échange de marqueur, des mutants arb d'erwinia chrysanthemi ont été construits. L'étude comparative de la séquence des gènes arb avec celles de l'operon bgl d'e. Coli a montré que (i) les structures tige boucle terminateurs de la transcription de l'operon bgl sont présents dans les gènes arb; (ii) arbg est similaire à bg1g, l'antiterminateur d'e. Coli, ce qui suggère que arbg joue le rôle d'antiterminateur, et (iii) arbf et arbb sont similaires à bg1f et g1b de l'operon bgl, respectivement. Un promoteur localise en amont de arbb existe et permet la synthèse indépendante de arbb. Ceci pourrait permettre un taux de synthèse de arb tel qu'il n'y ait pas d'accumulation des b-glucosides phosphoryles toxiques pour la cellule. De plus dans la région intercistroiques arbg/arbf, deux séquences de promoteurs ont été identifiées

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