Etude du polymorphisme de l'hormone de croissance (gh) chez la truite arc-en-ciel (oncorhynchus mykiss)

par PING-DE NIU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques

Sous la direction de Patrick Jego.

Soutenue en 1990

à Rennes 1 .

mots clés

Résumé

Nous nous etions fixes, comme but de ce travail effectue chez la truite arc-en-ciel (oncorhynchus mykiss), la mise en evidence des differentes formes de la gh hypophysaire et serique et d'en connaitre les caracteristiques biochimiques et biologiques. Dans un premier temps, nous avons mis au point un dosage des igf de truite, afin d'etudier la stimulation de la secretion d'igf hepatocytaire par les differentes formes de gh. Ce dosage, qui utilise la proteine porteuse serique comme ligand, est tres specifique de l'igf1 et de l'igf2 et ne reconnait ni l'insuline ni les differentes hormones hypophysaires testees. Apres l'incubation qui a lieu a l'equilibre, la separation entre l'#1#2#5i-rhigf1 libre et liee est obtenue par du charbon actif. Dans ces conditions, la sensibilite obtenue (ed#9#0) est de 0,40 ng/ml. Dans les echantillons a doser, pour separer les igf de leur proteine de liaison, nous proposons une technique plus rapide que celles traditionnellement utilisees, basee sur l'utilisation d'un gel echangeur de cation (sp sephadex c-25) incube directement avec l'echantillon. Les rendements d'extraction ainsi obtenus sont environ 90%. En utilisant ce dosage, nous avons montre qu'in vivo, la gh bovine etait capable d'augmenter les niveaux d'igf plasmatique chez la truite. Par contre les experiences in vitro, n'ont pas permis de visualiser l'effet stimulant de la gh sur la secretion d'igf par des hepatocytes en culture. Des ameliorations sont necessaires pour rendre operationnel ce test d'activite biologique de gh. En utilisant la combinaison de trois techniques (chromatographie, electrophorese et electrofocalisation), nous avons montre que, comme chez les mammiferes, la gh de truite etait presente sous plusieurs formes. Dans l'hypophyse comme dans le serum, la forme monomerique reduite 23 kd represente au moins 80% de l'activite immunologique totale. Elle est composee de 4 variants de charges ayant de

Titre traduit

Studies on polymorphism of growth hormone (gh) in rainbow trout (ocorhynchus mykiss)

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