Hybridation somatique chez la pomme de terre

Somatic hybridization in potato (solanum tuberosum l. )

• Auteur / Autrice : JEAN MASSON
• Direction : GEORGES PELLETIER
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Un procede de regeneration de plantes a partir de protoplastes de mesophylle de clones diploides a ete mis au point. La culture in vitro des plantes-meres, sous un eclairement d'intensite 120 microe?m##2?s##1, et de photoperiode 13 heures, a permis d'obtenir des taux de division des protoplastes de 50%. Le procede de regeneration fait appel a quatre milieux de culture differents permettant: 1) l'obtention de divisions de protoplastes; 2) le developpement de colonies; 3) le developpement de cals; 4) la regeneration de plantes. La composition de ces differents milieux a ete optimisee. Cette methode a permis la regeneration de plantes a partir de protoplastes pour 17 clones diploides sur les 19 etudies. Des conditions de transfert direct de genes par electroporation de protoplastes ont ete mises au point. Elles permettent l'obtention de frequences de transformation de 0,5% a 2%. Trois clones diploides transformes ont ete regeneres: 217, resistant a la kanamycine, 90, resistant a l'hygromycine, et 71, resistant au chlorsulfuron. Des protoplastes des clones transformes 217 et 90, 217 et 71, 90 et 71 ont ete fusionnes. Des colonies possedant la combinaison des resistances des deux parents ont ete selectionnes. Des plantes tetraploides ont ete regenerees a partir de ces colonies, pour les 3 fusions somatiques. Des hybridations moleculaires avec des sondes portant des sequences codant pour des arn ribosomiques ont montre que les plantes tetraploides etaient des hybrides somatiques