Compartimentation metabolique et structurale des polyphosphoinositides de la membrane du globule rouge humain

Metabolic and structural compartmentation of polyphosphoinositides of the human red cell membrane

• Auteur / Autrice : PHILIPPE GASCARD
• Direction : FRANCOISE GIRAUD
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le renouvellement rapide du phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (pip#2) dans les cellules est implique dans la production de deux seconds messagers resultant de son hydrolyse par une phospholipase c specifique (pic) apres l'activation de recepteurs. Le pip#2 joue egalement un role dans la regulation d'activites enzymatiques et d'interactions proteines-proteines. Dans le globule rouge humain la stimulation du renouvellement des polyphosphoinositides (ppi) sous l'activation de proteine kinases (c ou/et dependante de l'ampc) resulte de la phosphorylation d'une proteine commune indiquant que, comme dans les autres cellules, le metabolisme des ppi est controle par des proteine kinases. L'activation de la pic, induite par addition de ca#2#+ et du ionophore a23187 (puisque le globule rouge humain est depourvu de recepteurs stimulables) permet de mettre en evidence des populations de molecules sensibles ou resistantes a l'enzyme. Les premieres sont identifiees aux fractions rapidement renouvelees et accessibles aux kinases et aux phosphatases. La localisation des ppi, essentiellement dans le feuillet interne de la membrane, est demontree en mesurant l'hydrolyse provoquee par une phospholipase a#2 (pla#2) sur les erythrocytes. Ce resultat est confirme par des etudes immuno-cytochimiques a l'aide d'anticorps specifiques des ppi. Dans les membranes erythrocytaires permeables, les ppi ont une moindre accessibilite a la pla#2 que les autres phospholipides. Les molecules sensibles a la pic sont plus accessibles a la pla#2 que celles de la fraction resistante. Cette difference resulte des interactions de cette population de molecules sensibles a la pic avec des proteines du cytosquelette et avec le domaine cytoplasmique probablement de la bande 3 et/ou de la glycophorine