Utilisation des cellules primaires de la grande mammaire de lapine gestante pour l'etude du controle hormonal et l'expression des genes des proteines de lait

• Auteur / Autrice : RACHEL-AURORE MALIENOU NGASSA
• Direction : Louis-Marie Houdebine
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La culture des cellulaires primaires mammaires de lapine a ete mise au point. La prolactine seule induit la secretion des caseines dans le milieu. Le cortisol et l'insuline n'ont pas d'effet propre mais ont par contre un effet amplificateur de l'action de la prolactine. Certains inhibiteurs de la phosphorylation, le 6-dmap, le 2-ap et l'amiloride s'opposent a l'induction de la synthese des caseines par la prolactine. De meme, la colchicine, en se liant a la tubuline, inhibe l'effet de la prolactine. Les cellules primaires transfectees par des plasmides contenant le gene de l'hormone de croissance humaine, secrete l'hgh dans le milieu qui, par un phenomene d'autocrinie induit la synthese de la caseine- dans le meme milieu en absence de prolactine. Ces experiences, utilisant differentes methodes de transfection, ont permis de mettre en evidence un effet amplificateur inattendu d'un choc osmotique applique aux cellules, sur la sythese et la secretion de la caseine-. De meme, les parties regulatrices des genes hybrides caseine-#s#1-cat et wap-cat, qui font respectivement 3,5 et 6,3 kb repondent au signal prolactinique. Cette reponse est amplifiee par l'insuline et tres largement par le cortisol. L'expression du gene cat et d'autant plus forte que les cellules sont ensemmencees et transfectees sur gel de collagene plutot que sur support plastique. Les constructions comportant 6,3, 3 et 1,8 kb du promoteur du gene wap montrent qu'une region essentielle sensible aux hormones lactogenes se situe probablement entre 1,8 et 3 kb