Thèse de doctorat en Sciences de la vie
Sous la direction de Gérard Ailhaud.
Soutenue en 1990
à Nice .
L’utilité d'un milieu chimiquement défini, spécialement conçu pour les cultures de cellules épidermiques humaines est multiple. Un tel milieu permet : 1) la prolifération rapide des kératinocytes en monocouches, 2) leur différenciation terminale, 3) l'expression des marqueurs de différenciation épidermique dans un environnement parfaitement contrôlé où les cellules sont alors les seuls éléments variables. En ce qui concerne la recherche appliquée, il est possible de tester de manière reproductible sur de telles cultures de kératinocytes la cytotoxicité ou la cytocompatibilité de pansements devant entrer en contact avec des keratinocytes in vivo. De plus, pour mesurer précisément une éventuelle activité promotrice de prolifération de pansements contenant des facteurs de croissance, l'utilisation d'un milieu défini est essentielle. Il nous a été possible de cultiver des kératinocytes humains normaux en milieu défini sur des substrats inertes et exposés à l'air comme in vivo, et d'obtenir (donc en absence totale de facteurs dermique ou sérique) en deux semaines un épithélium multi-stratifié complètement différencié. Nous avons aussi étudié en milieu défini la différenciation des cellules A431, dérivées d'un carcinome épidermoïde humain. Les cellules a431, bien qu'incapables de former des enveloppes cornées (signe majeur de la différenciation terminale) accumulent l'involucrine, un marqueur de différenciation, précurseur des enveloppes cornées, en présence d'EGF
The differentiation of normal and transformed human keratinocytes in defined medium : application to biomaterials
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