Recherche Avancée

Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Corinne Albiges-Rizo
Direction : Jadwiga Chroboczek
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
Date : Soutenance en 1990
Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Résumé

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Les adenovirus interagissent avec les recepteurs de la cellule hote par l'intermediaire d'une proteine allongee: la fibre. L'etude de la fibre comme modele pour la comprehension de l'interaction virus-recepteur necessite la connaissance de la structure de cette proteine. La preparation de cristaux de fibres d'ad2 trop petits et macles a encourage un nouveau projet de recherche sur la fibre d'ad3 connue pour etre plus petite. L'expression de la fibre d'ad3 fusionnee (14 acides amines au niveau de l'extremite n-terminale) dans e. Coli, sous le controle du promoteur t7 a permis d'obtenir des taux de synthese de la fibre plus eleves que dans le surnageant de cellues infectees. La proteine exprimee reste insoluble. Elle est solubilisee dans 6m uree. Des etudes biochimiques et biophysiques ont montre que la fibre s'auto-assemble sous forme de trimere dans les bacteries, mais que le repliement de cette proteine purifiee n'a pas atteint la morphologie finale. La fibre d'ad3 a ete egalement exprimee sans le peptide de fusion. Elle reste insoluble mais sa solubilisation dans 6m uree et sa purification ont conduit a l'obtention d'une proteine beaucoup plus structuree, laissant penser que le peptide de fusion affecte le repliement de la fibre. Le serum dirige contre la fibre recombinante a ete utilise pour purifier la fibre native d'ad3, libre et complexee a la base du penton. La morphologie de la fibre native en microscopie electronique est tres similaire a celle de la fibre recombinante non fusionnee