Etude experimentale du role des codons synonymes dans l'expresion de la beta-lactamase chez escherichia coli

par DELIN ZHU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de C. Reiss.

Soutenue en 1989

à Paris 7 .

mots clés

Résumé

Ce travail est une etude experimentale du role du biais de l'utilisation des codons dans l'expression genetique. Nous avons modifie, par les techniques de la mutagenese in vitro, le schema d'utilisation des codons chez bla, en remplacant un ou plusieurs codons mineurs par leurs synonymes majeurs, ou en introduisant exclusivement les codons frequents dans certaines regions du gene. Nous avons montre que l'introduction des codons majeurs (jusqu'a 19% des codons totaux) au milieu du gene, a peu d'effet sur le niveau global d'expression de bla, meme quand le gene est sous le controle du promoteur fort ptac. Nous proposons donc que pour bla, et probablement aussi pour d'autres genes moderement ou faiblement exprimes, l'elongation de la chaine polypeptidique n'est pas l'etape limitante de traduction. Dans ce cas au moins, la regulation de l'expression au niveau de la transcription et/ou a l'etape d'initiation de la traduction, est le mecanisme de controle dominant. Cependant, la vitesse locale du mouvement des ribosomes, au cours de la traduction, peut etre modulee par la modification muette de la sequence nucleotidique du gene; on constate alors que le mouvement non-uniforme des ribosomes peut avoir, dans certains cas, une influence importante sur l'expression. Les cellules d'e. Coli hebergeant le plasmide mute codant pour le mutant gly#1#1#4 a asp, sont temperature-sensibles a l'ampicilline; cela est du a: 1) la stabilite reduite de la proteine mutee; et 2) la difficulte de la maturation de la preproteine mutee

Titre traduit

Experimental studies of the role of the synonymous codons in the expression of beta-lactamase in escherichia coli

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