L'adenyl cyclase de bordetella pertussis

Bordetella pertussis adenylate cyclase

• Auteur / Autrice : Daniel Ladant
• Direction : Agnès Ullmann
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Bordetella pertussis, l'agent de la coqueluche secrete une adenyl cyclase qui constitue l'un des principaux facteurs de virulence de cet organisme. Cet enzyme bacterien presente l'originalite d'etre active par la calmoduline, une proteine regulatrice eucaryote. Nous avons purifie l'adenyl cyclase a l'homogeneite; elle possede l'activite specifique la plus elevee connue pour cette classe d'enzymes. Elle est constituee d'une chaine polypeptidique de 43-50 kilodaltons qui fixe une molecule de calmoduline avec une grande affinite. Par proteolyse limitee du complexe adenyl cyclase/calmoduline, nous avons identifie, dans la molecule d'adenyl cyclase, deux domaines d'interaction avec la calmoduline. Le clonage du gene de l'adenyl cyclase de b. Pertussis nous a permis d'etudier et de caracteriser la proteine exprimee chez e. Coli. La determination de la sequence nucleotidique du gene a revele l'existence d'une phase ouverte de 1706 acides amines: l'adenyl cyclase se situe dans la partie n-terminale; la partie c-terminale presente une homologie de sequence avec l'hemolysine d'e. Coli. Ces donnees suggerent que l'adenyl cyclase pourrait etre synthetisee sous forme d'un precurseur commun, adenyl cyclase-hemolysine. Un tel precurseur, d'un poids moleculaire apparent de 200 kilodaltons a ete identifie dans les souches virulentes de b. Pertussis; nous avons montre que, dans certaines conditions de culture, cette forme d'adenyl cyclase de 200 kilodaltons peut etre secretee par b. Pertussis sans proteolyse. Enfin, nous avons mis en evidence une parente antigenique entre les adenyl cyclases calmoduline-dependantes de b. Pertussis et de cerveau de rat. L'hypothese d'une origine evolutive commune pour ces deux enzymes est ainsi serieusement etayee