Thèse soutenue

Clonage, structure et étude de l'expression du gène de la méthionyl-tARN synthétase d'Escherichia Coli
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Auteur / Autrice : Frédéric Dardel
Direction : Paul Cohen
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Biologie moléculaire et cellulaire
Date : Soutenance en 1989
Etablissement(s) : Paris 6
Jury : Examinateurs / Examinatrices : Sylvain Blanquet, Isabelle Saint-Girons, Guy Fayat
Rapporteurs / Rapporteuses : Marianne Grunberg-Manago, Claude Lazdunski

Mots clés

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Résumé

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Le gène metG codant pour la methionyl-tarn synthetase d'e. Coli a été cloné et séquencé. La région en amont de ce gène a révélé une phase ouverte divergente codée par l'autre brin d’ADN et démarrant seulement 132 nucléotides en amont. Cette phase ouverte, appelée mrp, code pour une protéine de 39 kd de fonction inconnue mais présentant un site consensus de fixation de l'atp retrouve dans plusieurs atpases. Les signaux de transcription de ces deux gènes ont été déterminés. Mrp et metG constituent des opérons monocistroniques, mais ce dernier peut être exprimé à partir de deux promoteurs, l'un proximal situe dans la région intergénique et l'autre distal situe 500 bases en amont, dans le gène mrp. La transcription du promoteur distal est modulée par un terminateur situe avant metg. Des fusions génétiques metg: lacz ont ete construites et ont permis de montrer que l'expression de metg était régulée par le niveau intracellulaire d'activité de la methionyl-tarn synthétase. Ces résultats sont en accord avec les travaux physiologiques antérieurs. Un modèle moléculaire de l'expression de metg base sur ces résultats a pu être proposé. Il postule que la methionyl-tarn synthétase se fixe sur son ARN amont, au niveau d'un site présentant des homologies avec son substrat le tARN. Cette fixation modulerait la terminaison au niveau du terminateur amont, dans un mécanisme analogue à l'atténuation. Les outils informatiques réalisés pour ce travail sont également présentés.