Les proteines de transfert de lipides chez les vegetaux superieurs : purification, biosynthese, caracterisation d'adn complementaire

par Vincent Arondel

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-Claude Kader.

Soutenue en 1989

à Paris 6 .

mots clés

Résumé

Une proteine de transfert de lipides (ltp) a ete isolee et purifiee a partir de semences de tournesol. Elle presente des caracteristiques communes avec la plupart des ltp vegetales et est, en outre, capable de fixer les acyl-coa. La biosynthese de la ltp de mais a ete etudiee in vivo et in vitro. Des anticorps specifiques ont reconnu deux bandes qui correspondent, d'une part a la proteine purifiee et, d'autre part, a une proteine de plus faible masse moleculaire. Ces deux proteines sont tres abondamment synthetisees 4 jours apres la germination, sous forme de precurseurs de masse moleculaire plus elevee. Un adn complementaire (adnc) correspondant a la ltp de mais a ete obtenu. La comparaison de la sequence proteique deduite avec celle de la proteine purifiee montre l'existence d'un extrapeptide, qui presente toutes les caracteristiques d'un peptide signal. Un autre adnc codant pour la ltp de mais a ete obtenu, qui presente une insertion de 74 nucleotides situee a la fin de la partie codante, ce qui modifie la sequence c-terminale de la proteine deduite. Des analyses effectuees par hybridation southern montrent que la ltp de mais est codee par un ou deux genes, et suggerent que les deux adnc derivent d'un meme gene. Les ltp vegetales presentent entre elles de nombreuses homologies de sequences, notamment au niveau de certains residus charges, ainsi que des 8 residus cysteine qui sont tous conserves. Une banque d'adnc de tournesol a ete constituee, et criblee avec les sondes d'adnc de mais, mais aucun clone correspondant a la ltp de tournesol n'a pu etre isole

Titre traduit

Lipid transfer proteins from higher plants: purification, biosynthesis and isolation of complementary dna

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