Signaux impliques dans les processus de secretion des proteines chez la levure saccharomycescerevisiae : exemples compares d'une proteine de la paroi, la phosphatase acide, et d'une proteine de la membrane plasmique, l'uracile permease

par SANDRA SILVE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Daniel Blangy.

Soutenue en 1989

à Paris 6 .

mots clés

Résumé

La phosphatase acide de levure saccharomyces cerevisiae est un exemple typique de proteine secretoire. Cette glycoproteine, localisee dans la paroi, est synthetisee sous forme de precurseur comportant, a l'extremite n-terminale, un peptide signal de 17 acides amines. Apres deletion de la sequence codant pour son peptide signal, la proteine modifiee n'est plus transloquee in vitro dans des microsomes de pancreas de chien. L'expression de cette proteine dans la levure in vivo conduit essentiellement a l'accumulation dans le cytosol d'une forme non glycosylee de la proteine. Cependant, un faible pourcentage de cette proteine peut etre transloque, core-glycosyle et secrete a la surface cellulaire. Ce phenomene inattendu pourrait etre partiellement explique par la presence d'une petite sequence hydrophobe a l'extremite n-terminale de la partie mature de la phosphatase acide. Nous avons utilise la phosphatase acide comme proteine marqueur pour determiner les signaux de translocation d'une proteine polytopique de la membrane plasmique depourvue de peptide signal, l'uracile permease. Pour cela, nous avons effectue des fusions entre des sequences n-terminales croissantes de l'uracile permease et la partie mature de la phosphatase acide, et nous avons analyse le devenir intra-cellulaire des proteines hybrides ainsi formees. Ceci nous a permis de determiner le premier signal interne permettant la translocation de la proteine a travers la membrane du reticulum endoplasmique. Cette methodologie devrait aussi nous permettre de determiner le mode de repliement de l'uracile permease dans la membrane

Titre traduit

Signals involved in the transport to the cell surface of two yeast proteins: acid phosphatase, a cell wall glycoprotein, and uracil permease, a polytopic protein of the plasma membrane

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