Immunonéphélémétrie sur supports microparticulaires : Modélisation de systèmes de dosage

par Rachida El Omari

Thèse de doctorat en Biologie appliquée à la nutrition et aux bioindustries

Sous la direction de Jean Duheille.

Soutenue en 1989

à Nancy 1 .

mots clés

• Immunonéphélémétrie
• Microsphères
• Dosages non radiosotopiques
• Immunocapture
• HCG
• Néphélométrie
• Technique immunoenzymatique
• Gonadotrophines chorioniques

Résumé

L'immunonéphélémétrie quantifie la lumière dispersée par des complexes immuns Ag/Ac par la fixation de l'un ou l'autre des partenaires de la réaction sur les microparticules elles mêmes susceptibles de disperser la lumière (MS) fait de cette technique l'immunonéphélémétrie à supports microparticulaires. Ce procédé cumule des avantages pratiques indéniables et de simplicité, de rapidité, de sensibilité, de reproductivité, de précision et d'adaptabilité. Notre travail a pour objectif de développer, par cette technique, différents modèles de dosage d'hCG, suceptibles d'être transposés à d'autre molécules biologiques, et en particulier aux autres hormones glycoprotéiques (TSH, LH et FSH) de structure voisine. 16 systèmes de détection/dosage sont exposés, ils sont fondés sur des réactions directes ou d'inhibition, simples ou amplifiées, mettant en oeuvre des Ac polyclonaux, ou plus souvent des Acm anti hCG complémentaires ou non, libres ou fixés sur microsphère (MS), seuls ou en mélange, mis à réagir avec de l'hCG monomère libre ou couplée sur MS, pure ou associée à de l'HSA. Des conclusions d'ordre technologiques, pratique et d'autres plus fondamentales ont pu être émises : le seuil de détection atteint 4 uUI/ / ml de milieu de dosage. Le passage en milieu biologique et l'extrapolation des modèles de dosage, développés à l'aide d'hCG, à d'autres hormones glycopotéiques n'a pas posé de problèmes insurmontables. En immunéphélémétrie microparticulaire, l'affinité et la complémentarité des Acm sont des paramètres d'autant plus importants qu'ils peuvent être modifiés selon que l'Acm ou l'Ag est libre ou fixé sur les MS

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