Étude de l'influence de conditionnements morphogénétiques in vitro sur l'aptitude à régénérer chez des légumineuses (pois, soja, luzerne)

par Agnès Davi

Thèse de doctorat en Développement et amélioration des végétaux

Sous la direction de Yves Demarly.

Soutenue en 1985

à Paris 11 , en partenariat avec Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne) (autre partenaire) .

mots clés

• Régénération in vitro
• Floraison in vitro
• Luzerne
• Pisum sativum
• Bouturage
• Embryogenèse somatique

Résumé

Cette thèse tente d'évaluer une méthodologie en vue d'améliorer l'aptitude de tissus somatiques à régénérer « in vitro ». Il s’agit d'appliquer des pré-traitements « in vitro » pour conditionner favorablement les explants. La première étape consiste à définir des protocoles standards de culture de tissus permettant d'obtenir des régénérations somatiques chez le pois (Pisum sativum L. ), le soja (Glycine max L. Merr) et la luzerne (Medicago sativa L. ) de façon stable et répétée. Dans un second temps, l'incidence de pré-traitements "in vitro" sur l'aptitude à régénérer du matériel végétal est étudiée. Ces pré-traitements sont un bouturage "in vitro" et/ou un cycle de culture "in vitro" régénératif. Chez le soja, où la technique retenue ne permet pas d’obtenir la régénération de plantes entières, ces conditionnements n’ont pas d'effet positif. Par contre, chez le pois et la luzerne, les pré-traitements permettent d'améliorer l’aptitude des tissus à régénérer. L'importance de la détermination des protocoles régénératifs ainsi que le choix du conditionnement "in vitro" à appliquer sont discutés. Des hypothèses sont émises sur l'origine de l'amélioration de l'aptitude à régénérer ainsi observée. Enfin, les phénomènes de floraison "in vitro" apparus chez le soja et le pois sont évoqués, leurs conséquences et leurs intérêts envisagés, de même que sont proposées des perspectives d'utilisation des conditionnements "in vitro" pratiqués dans cette étude en vue d'une extension à d'autres espèces ou protocoles de culture "in vitro".

Titre traduit

Study of the influence of in vitro morphogenetical conditionings on the ability to regenerate in several leguminous (Pea, Soybean, Alfalfa)

Résumé

This work is an attempt to evaluate a methodology to improve somatic tissues ability to regenerate in vitro. Thus, in vitro pretreatments are applied in order to condition favorably the explants. The first part consists in defining standard tissue culture protocols which allow the stable and repetitive obtaining of somatic regenerations in pea (Pisum sativum L. ), soybean (Glycine max L. Merr) and alfalfa (Medicago sativa L. ). The second part is a study of the incidence of in vitro pretreatments on the tissues ability to regenerate. These pretreatments are an in vitro cutting or/and an in vitro regenerating culture cycle. For soybean, for which the selected regeneration technique does not enable the obtaining of entire plants, these conditionings do not provide a positive result. On the contrary, they allow an improvement of the capacity to regenerate for pea and alfalfa tissues. The importance of settling the regeneration protocols as well as the choice of the in vitro conditionings to apply are discussed. Hypotheses are expressed on the origin of the noticed improvement of the potentiality to regenerate. At last, the in vitro flowering phenomenons which appeared in soybean and pea cultures are evoked and their consequences and possible profits suggested. Moreover, prospects of employing such in vitro conditionings as the ones described in this study are suggested with the aim of extending the technique to other species and other in vitro culture protocols.