Génération d'une plateforme protéomique de traitement haut débit pour l'identification et la caractérisation des VHH recombinants contre CD105

par Milagros Quintana CáCeda

Projet de thèse en Chimie Biologie

Sous la direction de Yoann Roupioz.

Thèses en préparation à Grenoble Alpes en cotutelle avec l'Universidad Peruana Cayetano Heredia , dans le cadre de Chimie et Sciences du Vivant , en partenariat avec Systèmes Moléculaires et Nano Matériaux pour l'Énergie et la Santé (laboratoire) depuis le 20-04-2017 .


  • Résumé

    Ce projet vise à générer une simple plateforme protéomique de protéine recombinante VHH à partir d'alpaga afin de cribler une banque d'ADNc générée contre CD105, important marqueur de cellules endothéliales, de néovascularisation et cible thérapeutique prometteuse du cancer humain. Mettre en œuvre un système qui accélère l'identification de nanocorps spécifiques ayant une grande affinité pour le CD105, en élargissant la diversité du répertoire évalué, ce qui signifie enrichir les informations générées par les systèmes de criblage classiques et éviter leurs principales limitations. La caractérisation de certaines VHH sélectionnées et leur application en tant qu'outils permettant d'accroître la sensibilité à la détection de CD105 seront effectuées à l'aide de la technologie des biocapteurs basée sur la résonance superficielle du plasmon (SPR). Afin de déterminer la variabilité fonctionnelle de VHH de haute affinité et spécificité vis-à-vis de CD105 et leur utilisation potentielle en ingénierie tissulaire, des essais sur son utilisation en tant que molécule médiatrice sur l'union de cellules de soutien pour la différenciation des cellules mères mésenchymateuses seront conduits.

  • Titre traduit

    Generation of a proteomic platform of high processivity for the identification and characterization of recombinant VHHs against CD105


  • Résumé

    This project is directed towards the generation of a simple proteomic platform of VHH recombinant protein from alpaca in order to screen cDNA library generated against CD105, an important endothelial cell marker, of neovascularization and a promising therapeutic target of human cancer. Implementing a system that accelerates the identification of specific nanobodies with high affinity towards CD105, expanding the diversity of the evaluated repertoire, meaning to enrich the information generated from the conventional screening systems and avoid their main limitations. The characterization of selected VHH and their application as tools that allow an increase in sensitivity towards the CD105 detection will be made using biosensors technology based on superficial plasmon resonance (SPR). In order to determine the functional variability of high-affinity and specificity VHH against CD105 and their potential use in tissue engineering, trials on its use as a mediating molecule on the union of supporting cells for the differentiation of mesenchymal mother cells will be run.