Analyse du microenvironnement et de l'oncogenèse des tumeurs surexprimant l'Angiopoiétine 2 et/ou le CD138

par Marine Jary (Martin-jary)

Projet de thèse en Médecine, cancérologie, génétique, hématologie, immunologie

Sous la direction de Christophe Borg et de Jean-Paul Feugeas.

Thèses en préparation à Bourgogne Franche-Comté , dans le cadre de École doctorale Environnements, Santé (Dijon ; Besançon ; 2012-....) , en partenariat avec RHG - Interaction hôte-greffon-tumeur et infénierie cellulaire et génique (laboratoire) depuis le 23-10-2015 .


  • Résumé

    Rationnel et Objectifs du travail: L'Angiopoiétine-2 (Ang2) et le CD138 (=Syndecan-1) sont deux biomarqueurs qui reflètent le microenvironnement tumoral. Dosés avant initiation d'un traitement par chimiothérapie et anti-angiogénique chez des patients présentant un CCRm en première ligne thérapeutique, leur taux sérique est prédictif de la survie globale. Un score pronostique a également été publié par notre équipe, basé sur le dosage sérique du CD138 et des LDH. Par ailleurs, des données préliminaires ont également suggéré une corrélation inverse entre le taux d'Ang2 et la réponse immunitaire anti tumorale, réalisée via la mesure de la sécrétion d'interféron-gamma des LT CD4 spécifiques polarisés Th1 stimulés par les peptides dérivés de la télomérase (Universal Cancer Peptides, UCP). Un effort de recherche est donc en cours pour caractériser les mécanismes en cause. Les récepteurs Tie2 qui lient l'Ang2, sont présents notamment sur des cellules immunosuppressives (Myeloid Derived Suppressor Cells MDSC) ayant un phénotype M2 like, et dont les caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles sont en cours d'étude dans notre laboratoire. Quelques données de la littérature font émettre l'hypothèse d'un lien entre la sécrétion d'Ang2 et le CD138, pouvant impliquer la voie de l'EGFR. L'objectif de ce travail sera donc d'identifier les voies de signalisation impliquées dans la sécrétion de ces deux biomarqueurs, afin d'évaluer les mécanismes en cause dans le mauvais pronostic des patients, et d'implémenter ce travail à la clinique sur une cohorte prospective (Epitopes-CRC02) afin d'étudier les interactions entre ces biomarqueurs issus de l'angiogenèse et du stroma tumoral avec le statut immunologique des patients. Matériel et Méthodes : Une étude multicentrique prospective en cours, Epitopes-CRC02, comprenant des patients présentant un CCRm en première ligne de traitement, permettra de valider ou non le caractère pronostique de ces biomarqueurs sur la survie globale, et ouvre la possibilité à la réalisation de différentes études complémentaires, sériques et tumorales. 258 patients sont inclus dans cette étude. La caractérisation de l'Ang2 sur les tumeurs primitives ou sur les métastases sera réalisée par RT-PCR ou par IHC. La mesure du taux sérique d'Ang2 et de CD138 sera réalisée par ELISA. La réponse immunitaire sera évaluée par IHC ou par ELISPOT. L'évaluation moléculaire des tumeurs Ang2+ ou CD138+ sera réalisée par RTqPCR et/ou séquençage ciblé des hot-spots mutationnels. La modélisation préclinique évaluant les voies de signalisation candidates sera réalisée en partie par co-cultures cellulaires in vitro. Notre laboratoire dispose de lignées cellulaires de cancers colorectaux, de prélèvements tumoraux issus de métastasectomie ou d'ascite. Ce matériel sera utilisé pour l'étude de l'influence des voies de signalisation identifiées au cours de notre étude (comme Tie 2) sur les interactions entre cancer/stroma et système immunitaire. Programme expérimental : Ce travail de thèse sera donc orienté en deux volets. - Un volet expérimental comprenant : o Un programme de recherche sur les voies de signalisation en cause dans la libération et la régulation de l'Ang-2 et du CD138, et l'analyse de leur lien commun ainsi que de leurs liens avec les éléments du système immunitaire. Ceci comportera la poursuite de l'identification des cellules immunitaires exprimant le récepteur Tie2 chez l'homme, et l'évaluation de l'influence des MDSC sur la progression des cancers. Une recherche de gènes candidats régulant les cellules effectrices de l'Ang-2 sera réalisée grâce à des méthodes de bioinformatique. L'évaluation de l'influence de l'expression de l'Ang-2 et du CD138 sur les réponses immunitaires anti-tumorales in vivo sera aussi réalisée, ainsi ue l'analyse de la voie Ras/Raf/MapK et de son lien avec CD138 o La corrélation entre l'Ang2-CD138 et la qualité des infiltrats lymphocytaires, les marqueurs de l'hypoxie, et ceux de la voie de l'EGFR ; sur des métastases hépatiques Un volet clinique comprenant : o La description des populations en fonction de ces biomarqueurs, la distribution précise des métastases, l'étude de l'évolution du taux d'Ang2 et de CD138 au cours de la chimiothérapie o La validation clinique de l'intérêt du dosage ELISA ou de la recherche en IHC de l'expression de ces deux biomarqueurs. L'évaluation du rôle prédictif de ces biomarqueurs sur le taux de réponse (radiologique, histologique, et ADN tumoral circulant) et sur la survie sans progression sera réalisée. Le rôle prédictif de récidive après chirurgie métastatique hépatique, ainsi que l'évaluation du rôle prédictif de ces biomarqueurs sur l'efficacité du traitement (chimiothérapie, thérapies ciblées ou chirurgie) seront décrits. o L'évaluation de la corrélation entre la réponse immunitaire et l'expression de ces biomarqueurs, ainsi que le rôle pronostique de cette corrélation. Ce projet s'oriente enfin sur la proposition d'une étude clinique interventionnelle, si les données préliminaires sont validées, proposant une prise en charge guidée par le dosage de ces biomarqueurs.

  • Titre traduit

    Pathways and mechanisms involved in the microenvironment and oncogenesis of Angiopoietin 2 and CD138 overexpressed solid tumors.


  • Résumé

    Prognostic biomarkers stratifying treatment strategies in colorectal cancer (CRC) are lacking. We previously described that Angiopoietin 2 (Ang2) plasmatic levels are associated with a worst overall survival (OS) in metastatic setting (Jary et al, CEBP 2015). No data is yet available concerning Ang2 prognostic value in localized CRC. Using the open source transcriptomic tools, we decided to define the specific molecular signaling pathways correlated to Ang2 expression in CRC and its prognostic value in localized CRC. The analysis od CD138 biomarker is also associated to this project.