Synthèse de sondes luminescentes pour la détection séquence spécifique d'ADN double brin.

par Guillaume Fremy

Projet de thèse en Chimie organique

Sous la direction de Olivier Seneque et de Muriel Jourdan.

Thèses en préparation à Grenoble Alpes , dans le cadre de Chimie et Sciences du Vivant , en partenariat avec Laboratoire de Chimie et Biologie des Métaux (laboratoire) depuis le 01-10-2016 .


  • Résumé

    Les méthodes actuelles pour la détection séquence-spécifique d'ADN par fluorescence ne permettent que de détecter des ADN simple brin. Elles reposent sur l'hybridation avec un brin complémentaire et imposent de travailler en conditions dénaturantes. Nous proposons une approche nouvelle qui permettra de développer des sondes luminescentes capables de reconnaître et signaler n'importe quelle séquence d'ADN double brin d'au moins 12 paires de bases. Pour cela, nous utiliserons la reconnaissance des doubles brins d'ADN par les protéines à doigts de zinc. Nous utiliserons un peptide à doigts de zinc capable de dimériser en présence de l'ADN cible et nous le fonctionnaliserons de manière adéquate par un complexe de lanthanide et un chromophore « antenne » qui permettra de sensibiliser ce dernier. Ainsi, nous profiterons des propriétés de luminescence de lanthanides, particulièrement intéressantes pour la détection en milieu biologique.

  • Titre traduit

    Luminescent probes synthesis for sequence-specific recognition of double-stranded DNA.


  • Résumé

    The current methods for detection of sequence specific DNA by fluorescence allow only to detect DNA simple strand. They are based on the hybridization with a complementary strand and impose to work in non naturing conditions. We propose a new approach which will allow to develop luminescent probes capable of recognizing and indicating any double DNA sequence strand of at least 12 pairs of bases. For that, we shall use the recognition of double strand DNA by zinc fingers proteins. We shall use a zinc fingers peptide capable of dimerise in the presence of the target DNA and we will functionalize it in an adequate way by a complex of lanthanide and a chromophore "antenna" which will allow to make sensitive lanthanide. So, we shall take advantage of the properties of lanthanides luminescence, particularly interesting for the detection in biological environment.