Contribution à l’étude de venin animal ; analyse protéomique et exploration des propriétés biologiques du venin de Montivipera bornmuelleri à la recherche de biomolécules d’intérêts

par Claudine Accary

Thèse de doctorat en Science de la Vie et de la Santé

Sous la direction de Jean-Claude Desfontis.

Thèses en préparation à Nantes, Ecole nationale vétérinaire en cotutelle avec l'Université libanaise , dans le cadre de École doctorale Biologie-Santé Nantes-Angers depuis le 15-12-2010 .


  • Résumé

    La richesse moléculaire de venins de serpents constitue une source importante de molécules bioactives d’intérêts. Explorer le venin brut du serpent, extraire et caractériser les biomolécules, constituent actuellement des enjeux scientifiques importants, lesquels sont à la base de nos travaux de thèse. L’objectif a donc consisté en l’évaluation de l’intérêt du venin du Montivipera bornmuelleri, une vipère de Liban. La stratégie utilisée en premier temps était l’exploration des activités antibactériennes et antifongiques, effets proinflammatoire, sur la cascade de la coagulation sanguine et aussi hémolytique du venin brut. Une analyse du son contenu protéique a été élaborée également dans le but d’identifier les protéines au sein du venin, lesquelles sont considérées responsables de la globalité de son activité biologique. En second temps, des travaux d’isolement des biomolécules conduisant à l’utilisation combinée de différentes méthodologies d’extraction ont été entrepris et permis d’isoler deux enzymes, la phospholipase A2 (PLA2) et la L-aminoacide- oxydase (LAAO). Ces deux dernières ont été caractérisées et leurs propriétés physico-chimiques et biologiques ont été explorées démontrant une activité pharmacologique d’intérêt. La dernière partie de nos travaux a démontré le potentiel de ce venin à induire un effet relaxant sur les aortes isolées de rat Wistar via plusieurs mécanismes d’action. Enfin, il s’agit d’un extrait venimeux constituant apparemment une source riche en molécules biopharmaceutiques et mérite d’être étudié profondément afin d’y rechercher des vrais candidats-médicaments.


  • Résumé

    Molecular richness of snake venoms is an important source of potent bioactive molecules. Exploring the crude venom of snakes to extract and characterize its biomolecules, currently constitute important scientific issues, on which are founded our thesis. The objective was therefore to assess the interest of the venom of Montivipera bornmuelleri, a viper from Lebanon. The first approach was the exploration of its antibacterial and antifungal activities, its effects pro-inflammatory, on blood clotting cascade and on human blood erythrocytes. A proteomic characterization was also developed to identify proteins within the venom, which are considered responsible for the globality of its biological activity. Thereafter, biomolecules purification with combined use of different extraction methodologies have been initiated and resulted in the isolation of two enzymes, phospholipase A2 (PLA2) and L-amino-acidoxidase (LAAO). These two were characterized and their physico-chemical and biological properties have been explored showing pharmacological activity of interest. The last part of our works has demonstrated the potential of this venom to induce relaxant effect on isolated Wistar rat aorta via several mechanisms of action. At last, this is a venomous extract constituting apparently a rich source of biopharmaceutical molecules and deserves to be profoundly studied in order to seek real drug candidates.