Utilisation de gouttelettes d’émulsion pour l’étude de l’adhésion spécifique entre deux surfaces fluides

Functionalized emulsion droplets to study specific adhesion between two fluid surfaces

• Auteur / Autrice : Jean-Daniel Emerard
• Direction : Jérôme Bibette
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physicochimie
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés contrôlés

Gouttes

Complexes récepteur-ligand

Dynamique des fluides

Résumé

Nous avons mis au point un système expérimental modèle d’adhésion spécifique entre deux surfaces fluides sur lesquelles diffusent des protéines de type ligand-récepteur. Nous avons notamment voulu relier la mesure d’une énergie d’adhésion macroscopique à son moteur microscopique, la formation de liens spécifiques. Pour mesurer une énergie macroscopique d’adhésion, nous avons utilisé des gouttelettes d’émulsion. Lorsqu’elles adhèrent, les gouttelettes se déforment. Le gain de surface permet d’accéder à l’énergie d’adhésion. Comme moteur de l’adhésion spécifique, nous avons utilisé le couple modèle streptavidine/biotine. Les gouttelettes d’émulsion sont fonctionnalisées avec ces protéines ligantes. Amenées par gravité en présence de bicouches lipidiques supportées fluides dont une fraction des lipides porte les protéines réceptrices, les gouttelettes adhèrent spécifiquement aux bicouches lipidiques. Nous avons mené une étude statique de cette adhésion. Grâce à différentes techniques de fluorescence (épifluorescence, FCS (Fluorescence Correlation Spectroscopy), dosages en retour) nous avons quantifié le nombre de protéines mises en jeu dans nos patches adhésifs afin de le comparer à l’énergie de déformation de la goutte. Nous avons pu observer que l’énergie d’adhésion est proportionnelle à l’énergie d’un lien. Par ailleurs, des mesures en RICM (Reflection Iterference Contrast Microscopy) nous ont permis d’étudier la dynamique de croissance du patch adhésif. Nous avons pu mettre en évidence une croissance diffusive et quasistatique de la zone de contact. En jouant sur les quantités de protéines mises en jeu ainsi que sur leur nature (longueur des liens), nous avons exploré les différentes situations statiques et dynamiques de l’adhésion dans notre système modèle.