Etude structurale de la threonyl-arnt synthetase de t. Thermophilus

Structural study of threonyl-trna synthetase from t. Thermophilus

• Auteur / Autrice : VINCENT CURA
• Direction : Dino Moras
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

L'objet de ce memoire de these est l'etude de la threonyl-arnt synthetase (thrrs) d'une bacterie thermophile, thermus thermophilus. Le role crucial des aminoacyl-arnt synthetases lors de la synthese proteique et la regulation de l'expression de la thrrs font de cette enzyme un sujet interessant pour l'etude des relations structure-fonction. La premiere partie du travail a consiste a cloner et a sequencer le gene de l'enzyme. La proteine presente une forte homologie de sequence avec les thrrs issues d'autres organismes. Les alignements que nous avons effectues confirment l'organisation modulaire de ces enzymes. En particulier, le domaine du site actif et celui de l'extremite c-terminale sont communs a plusieurs aminoacyl-arnt synthetases alors que l'extremite n-terminale constitue un module structural propre aux thrrs. La thrrs de thermus thermophilus a ete surexprimee dans e. Coli afin d'obtenir les quantites de proteine requises pour la cristallisation en vue de l'etude cristallographique. La deuxieme partie du travail a ete la purification de l'enzyme et l'obtention de cristaux utilisables pour la diffraction des rayons x. Des donnees de diffraction de la proteine native ont ete enregistrees a partir des cristaux que nous avons obtenus et les donnees cristallographiques preliminaires ont ete determinees