Etude de la regulation de la transcription chez les eucaryotes superieurs : exemples des genes de l'aldolase a et de l'albumine

• Auteur / Autrice : Pascal Maire
• Direction : Axel Kahn
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Ce travail decrit les modalites d'expression de deux genes eucaryotes: l'aldolase a et l'albumine. L'activite enzymatique de l'aldolase a augmente au cours de la myogenese. Cela est du principalement a une augmentation de la quantite de son arnm. Une variation de la taille de l'arnm de l'alcolase a a ete observee pendant cette differenciation. Apres avoir clone et sequence l'extremite 5 du gene humain, nous avons montre qu'il possede trois promoteur optionnels, qui donnent naissance a trois especes d'arnm qui ne differentque dans leur partie 5 non codante. La determination de la repartition de ces differents types d'arnm nous a permis de demontrer que deux de ces promoteurs sont utilises de maniere ubiquitaire et qu'ils etaient induits lors de la proliferation cellulaire. Le troisieme promoteur possede une activite restreinte a la differenciation terminale du muscle squelettique. Par des experiences de transfection transitoire dans differents types cellulaires, nous avons demontre que pour l'un des promoteurs ubiquitaires, les elements d'adn necessaires a son expression ubiquitaire et inductible etaient localises dans les cinq cents nucleotides en amont du site d'initiation de la transcription. Dans un deuxieme temps, l'etude de l'interaction des proteines nucleaires de foie et de rate, sur la transcription in vitro du promoteur d'albumine nous a permis de definir une hierarchie d'importance des facteurs transcriptionnels impliques dans l'activation specifique de ce gene hepatique. Les proteines hnf1 et c/ebp, dbp, sont des activaturs forts et specifiques. D'autre part, un vecteur d'expression codant pour la proteine dbp, est capable lors de la transfection dans les cellules hepatomateuses, ou dbp est absent, d'activer le promoteur d'albumine